第9章吸光光度法-矿加专业摘要.ppt

* * §9-1　吸光光度法基本原理 分光光度法是根据物质对光具有选择吸收的特性而建立起来的分析方法。 本章主要讨论紫外-可见分光光度法。 分类:（1）比色分析法 （2）紫外及可见分光光度法 （3）红外分光光度法 （4）原子吸收分光光度法 第9章 吸光光度法 （1）灵敏度高： 10-5~10-6，10-7~10-8，10-10 mol·L-1 （2）准确度高： 比色分析，相对误差5~10%， 分光光度法，2~5%； （4）应用广泛： 可测定绝大多数无机物和许多有机物。 （3）操作简便快速； 分光光度法的特点 蓝绿 红 650-760 绿蓝 橙 610-650 蓝 黄 580-610 紫 黄绿 560-580 红紫 绿 500-560 红 蓝绿 490-500 橙 绿蓝 480-490 黄 蓝 450-480 黄绿 紫 400-450 互补光 颜色 ?/nm 不同颜色的可见光波长及其互补光 白光 青蓝 青 绿 黄 橙 红 紫 蓝 物质对光的选择性吸收 物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用而产生的，物质的颜色由透过光的波长决定。 例：硫酸铜溶液吸收白光中的黄色光而呈蓝色； 高锰酸钾溶液因吸白光中的绿色光而呈紫色。 如果两种适当颜色的光按一定的强度比例混合可以得白光，这两种光就叫互为补色光。物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。 吸收光谱曲线 测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，得到的一条吸收光谱曲线。 用途： ①进行定性分析； ②进行定量分析； ③选择吸收波长； ④判断干扰情况。 吸收曲线 图10.1 溶液吸收曲线 吸光度A ——物质对光的吸收程度（吸收光的强度）。 吸光度A与透光率T的关系为： 或： T = 10-A 溶液的透光率越小，吸光度越大，表明溶液对光的吸收越强。 朗伯-比尔定律 朗伯—比耳定律——光的吸收定律。其数学表达式为： A = abc A为吸光度，量纲为1， b为液层厚度，即光程长度，为比色皿的内宽，常以cm为单位， c为溶液浓度，单位g ? L-1， a为吸光系数，单位L ? g-1 ? cm-1 。 当c的单位为mol ? L-1时，吸光系数称为摩尔吸光系数，用ε表示，单位为L ? mol-1 ? cm-1。朗伯比尔定律表示为： ε是吸光物质在特定波长下的特征常数，它与入射光波长、溶液的性质以及温度等因素有关，而与溶液的浓度及液层厚度无关，通常所说某物质的摩尔吸光系数是指在最大吸收波长处的摩尔吸光系数εmax。 ?值越大，表示该吸光物质对此波长光的吸收能力越强，显色反应越灵敏，通常用于吸光光度分析的 ε＞104 L ? mol-1 ? cm-1 ?与a的关系为： 朗伯-比尔定律不仅适用于溶液，也适用于均匀非散射的气体和固体；不但适用于可见光区，也适用于紫外和红外光区。 若溶液中含有两种或两种以上的吸光物质，且各物间无相互作用，则测得的吸光度为各种吸光物质吸光度之和。 如溶液中含有A、B两物质，对波长为λ的光均有吸收，则 A = AA + AB 吸光度的加和性 在多组分的光度分析法中，就是以此为理论基础。 偏离朗伯-比尔定律的原因 但在实际工作中，特别是当溶液浓度较高时，往往会偏离线性而发生弯曲。 定量分析时，通常液层厚度是相同的，按照比尔定律，浓度与吸光度之间的关系应该是一条通过直角坐标原点的直线，称工作曲线或标准曲线。 导致偏离朗伯-比尔定律的因素主要有： ①非单色入射光引起的偏离 ② 化学因素 ③ 介质不均匀引起的偏离 为了避免产生对朗伯-比尔定律的偏离，测定时需注意： ①选择ε较大且吸收曲线较为平坦的光作为测定用光，通常选 ； ③严格控制显色反应条件。 ②合适浓度范围(线性范围内)； 主要部件 单色器 吸收池 检测器 显示器 光源 （1）光源 ——发射出一定波长范围的连续光谱。 可见光区通常用6～12V的钨丝灯，360～1100nm； 紫外区常采用氢灯或氘灯作为光源，200～375nm。 §9-2　光度计及其基本部件 （2）单色器 ——将光源发出的连续光谱分解为各种波长的单色光的装置。 它是分光光度计的核心部件。单色器的色散能力越强，分辨率越高，所获得的单色光就越纯。单色器由色散元件及其附件组成。 常用的色散元件为棱镜和光栅。 注意：为减少光的损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。吸收池要挑选配对，因为吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。 （3）吸收池（比色皿） 功能：