第12章分子研究技术摘要.docVIP

第12章 分子生物学技术 一、名词解释 1. 分子克隆 2. 载体 3. 转化 4. 感染 5. 基因工程 6. 转导 7. 转染 8. DNA变性 9. DNA复性 10. 退火 11. 筑巢PCR 12. 原位PCR 13. 定量PCR 14. 基因打靶 15. DNA芯片 16. 反义核酸技术 17. 核酸探针 二、填空题 1．DNA重组技术也称为（ ）或分子克隆。最终目的是（ ）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上即（ ），形成一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为（ ）。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 2．PCR的反应体系要具有以下条件： a、与被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的（ ）。 b、具有热稳定性的酶如：（ ）。 c、（ ） d、（ ） 3．PCR的基本反应过程包括：（ ）、（ ）、（ ）三个阶段。 4．转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②（　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　）； ③完成胚胎发育，生长为后代并带有外源基因； ④（　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　）。 5．限制性内切酶的切割方式有三种类型分别是（　　　　　　　　　　　　　 ）、（　　　　　　　　　　　　　　　　　　）、（　　　　　　　　　　　　　　　　　　）。 6．质粒DNA具有三种不同的构型分别是：（　　　　　 ）、（　　　　　 ）、（　　　　　）。在电泳中最前面的是（　　　　　　　 ）。 7．外源基因表达系统，主要有（　　　　　　）、（ 　　　）、（ 　　　　 ）和（ 　　　　　　　　）。 8．转基因动物常用的方法有：（　　　　　　　　　　　）、（　　　　　　　　　　　　　）、（　　　　　　　　　　　）。 9基因在某一染色体上的排列叫　　　　。确定某一基因在染色体上的位置叫做　　　　 ，常用的方法有：1、　　　　2、　　　　3、　　　　 。 10．Southern blotting 用于鉴别_____。 11．在质粒DNA的制备中，用酚或酚-氯仿混合液抽提以除去碱裂解液中残余---- --------------。 12．质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（ ），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（ ）。 三、选择题 1．下列限制性内切酶中，哪一类酶起作用时不需要ATP，…… 　　　　　　 A、Ⅰ类　　B、Ⅱ类　　C、Ⅲ类　　D、上述三类 答案：　 B、Ⅱ类 2．ECORⅠ限制性内切酶的识别和切割的核苷酸序列为　　　　 。 　　　　　　 A、　5’-G↓AATTC -3’　 B、5’-TTT↓AAA -3’　 　　　　　　　　　3’-CTTAA↑G -3’　　　　3’-AAA↑TTT -3’　 　　　　　　 C、　5’-AG↓CT-3’　　　　D、5’-GGGCC↓C -3’ 　　　　　　　　　3’-TC↑GA -3’　　　　　3’-C↑CCGGG -3’　　　　　考查点 ：　 限制性内切酶的切割。 课本内容：　 A为E.COR I的切割位点。B为Dra I的切割位点。C为Alu I的切割位点。D为Apa I、banⅡ、Bsp1266的切割位点。 答案：　 A 3．基因工程生产产品的主要优点为　　　　　 。 　A、生产方法简单，成本低廉　　B、能生产较稀少的药用蛋白，满足人类需要 　　　 C、是利用天然微生物生产的，没有毒性　　　 D、A+B+C 考查点 ：　基因工程的优越性。 答　　案：　D、A+B+C 四、是非题 1．用pUC质粒作克隆载体克隆DNA时，人们用显色法筛选重组质粒，即在有IPTG和X-gal的平板上，显示白色的菌落含有原始质粒，而显示蓝色的菌落含有重组质粒。（　） 2．在PCR反应中，对于短的寡核苷酸，退火温度可用下式计算：Tm=2(A+T)+4(G+C) 。（ 　） 五、简答题 1. 基因敲除的基本程序？ 2. DNA芯片的