1.2基因工程的基本操作程序理班導学案.docVIP

1．2 基因工程的基本操作程序 【课标要求】1简述基因工程基本操作程序的四个步骤2尝试设计某一转基因生物的研制过程。 【本节重难点】重点：基因工程基本操作程序的四个步骤 难点：（1）从基因文库中获取目的基因 （2）利用PCR技术扩增目的基因 ◆自主研习（理知识，固基础） 一、基因工程的基本操作程序简述 ①目的基因的 ；② 的构建； ③将目的基因 ；④目的基因的 。 二、基因工程的基本操作程序 （一）目的基因的获取 1．目的基因：主要是指 的基因，也可以是一些具有 作用的因子。 2．原核细胞和真核细胞的基因结构 （1）原核细胞的基因结构 （2）真核细胞的基因结构 3．目的基因的获取 目的基因可以从 中分离出来，也可以用 合成。 常用的方法有以下几种： （1）从基因文库中获取目的基因 （2）利用PCR技术扩增目的基因 ①PCR是_______________技术，是 的缩写。②原理：________________。， ③前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。 ④条件：DNA模板、 。 ⑤扩增过程： a．变性（ ℃）：目的基因DNA受热变性后接连为单链 b．退火（ ℃）： 与单链相应互补序列结合 c．延伸（ ℃）：在 的作用下进行延伸 Taq酶的特点是 。 （3）化学法直接合成 适用于基因比较 ，核苷酸序列又 。 （二） ——基因工程的核心 1．基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中 能 ，并且可以 ，同时， 使目的基因能够 。 2基因表达载体= + + + （1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，它是 识别和结合的部位，有了它才能驱动基因 ，最终获得所需要的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，相当于一盏红色信号灯，使 在所需要的地方停止下来。 （3）标记基因：作用是为了 ，从而将含有目的基因的细胞 出来，如 基因。 3．构建基因表达载体的过程：用　 　 （同、不同）种限制酶去切目的基因与运载体，再用　 　 使其连接,形成重组DNA分子。 （三）将目的基因导入受体细胞 将目的基因 受体细胞，并且在受体细胞内 和 的过程，称为转化。 （1）将目的基因导入植物细胞 ①农杆菌转化法 ② 法 ③ 法 （2）将目的基因导入动物细胞 ① 技术是将目的基因导入受体细胞的最有效方法。 ②操作程序：将含有目的基因的表达载体 → →获得 →显微注射→胚胎 →胚胎 →发育成具有新性状的动物 （3）将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物作为基因工程受体细胞的优点： 。 ②大肠杆菌细胞最常用的方法： a．用 处理细胞，使细胞处于一种 的生理状态，这种细胞称为 细胞； b．将 分子溶于缓冲液与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。 （四）目的基因的检测与鉴定 （1）检测转基因生物的 上是否插入了目的基因 检测方法：