105第五章基因工程载体.pptVIP

* 腺相关病毒载体（AAV）：属于非致病的微小 病毒科家族的成员，只有依赖于辅助病毒才能繁殖。 特点： 基因组小，只有几个kb； 无致病性； 免疫原性弱； 装载外源基因容量小，不超过5kb； 制备过程复杂 ； * 痘苗病毒载体：痘苗病毒是动物病毒中最大的一种，与天花病毒有密切的亲缘关系。长期被用作预防天花的疫苗。 病毒基因组中有很大的非必需区（28kb），可以切除，代之以较大的外源基因，或者同时插入几个外源基因，构成多价疫苗。 * 哺乳动物细胞基因转移的选择标记 氨基糖苷磷酸转移酶：G418 二氢叶酸还原酶（DHFR）MTX（氨甲喋呤） 胸苷激酶（TK）： APT （氨基喋呤） 潮霉素-B-磷酸转移酶（HPH）：潮霉素-B 黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（XGPRT）： 霉酚酸 腺嘌呤核糖脱氨酶（ADA）： * 嘌呤和嘧啶合成知识的回顾 哺乳动物细胞内的两条合成途径 1 从头合成：利用各种小分子，如氨基酸、CO2、NH3、磷酸核糖等，合成嘌呤或嘧啶环，进而合成核苷酸。 2 补救合成途径：利用细胞内原有的或从胞外吸收的碱基、核苷、核苷酸。 * 1.从头合成途径：利用小分子 合成核苷酸，包括胸苷酸 2.补救合成途径： 利用细胞内