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20感染的检查方法2011
第一节 病毒感染的诊断 一、标本的采集与送检:时间、操作、保存送检 二、病毒的分离培养与鉴定 动物接种 鸡胚培养 组织细胞 病毒鉴定:CPE,多核巨细胞,包涵体,红细胞吸附,干扰,PH改变 病毒的定量:PFU,LD50/TCID50 三、病毒感染的血清诊断 四、病毒感染的快速诊断 一、标本的采集与送检 时间、操作、保存与送检 二、病毒的分离培养与鉴定 动物接种 鸡胚培养 组织细胞 病毒鉴定:CPE,多核巨细胞,包涵体,红细胞吸附,干扰,PH改变 病毒的定量:PFU,LD50/TCID50 图20-1 * * 病毒在细胞内增殖的指标 1、CPE 2、红细胞吸附 正常细胞 病变细胞 病毒血凝实验 细胞培养液PH的改变 组织培养 器官培养 移植培养 细胞培养 原代、次代细胞 二倍体细胞 传代细胞 3、空斑形成单位(PFU) 病毒感染单层细胞后,产生的局限性病灶,称空斑,空斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称PFU;病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的空斑形成单位来表示。 病毒数量和感染性测定 1、蚀斑试验 2、ID50 或 TCID50 病毒感染鸡胚动物或细胞后,引起 50% 发生死亡或病变的最小量 病毒感染单层细胞后,产生的局限性病灶,称蚀斑,蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称蚀斑形成单位,病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位来表示 病毒的血清学诊断 中和试验 补体结合试验 血凝抑制试验 免疫扩散等 光镜:包涵体 电镜:观察病毒颗粒的形态结构 病毒抗原检测:免疫荧光 抗体检测:ELISA 核酸检测 杂交 Southern blot PCR Northern blot 四、病毒感染的快速诊断 狂犬病毒包涵体(Negri body) 巨细胞病毒包涵体---猫头鹰眼征
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