22付蓉 Flaer在鉴别“真”“假”PNH中的作用.pptVIP

总结 Flaer作为检测PNH克隆的新技术，较传统的CD59、CD55更敏感、准确，三型细胞分群清晰、准确，可更好地筛选微量PNH克隆，亦可鉴别“真假”PNH，为临床正确诊断疾病提供了新方法。 建议临床上检测CD59、CD55的同时 检测Flaer以减少误诊或漏诊 Flaer在鉴别“真”、“假”PNH中的作用 付蓉 天津医科大学总医院血液科 磷脂酰肌醇 GPI锚的减少或缺失 补体激活增加，血细胞被破坏，血管内溶血 锚连蛋白 PNH定义 是一种获得性 造血干细胞异 常克隆性疾病。 PNH三大临床特点 溶血性贫血 易栓倾向 不同程度的骨髓衰竭 PNH 发病机制 正常克隆 PNH克隆 通过多种机制获得增殖优势 PNH PNH双重发病机制 需常规筛选PNH的病人 Coombs（-）的溶血性贫血 再生障碍性贫血 难治性贫血伴有全血细胞减少或溶血的患者出现无法解释的血栓性疾病 CD55、 CD59 Ham 试验 糖水实验 蛇毒因子试验 微量补体敏感 试验 FLAER (reagent fluorescent aerolysin) RBCs RBCs Leukocyte Leukocyte PNH克隆的筛选/PNH诊断 嗜水气单胞菌溶素变异体（Flaer） 1999年，Brodsky等首先发现PNH 细胞对气单胞菌溶素（aerolysin)抵抗，利用这一特性可将GPI-和GPI+细胞区分出来 Flaer即Alexa-488标记的前aerolysin变异体，它同野生型aerolysin相似，可特异性的结合于GPI锚，但不形成细胞通道，故不导致细胞死亡 较CD59、CD55更准确、敏感、特异 检测白细胞 嗜水气单胞菌溶素变异体（Flaer） CCS PNH Guidelines: Possible WBC Reagent Combinations Colors Cells 1 2 3 4 5 6 3 color G FLAER CD24 CD15 3 color M FLAER CD14 CD33 4 color G FLAER CD24 CD15 CD45 4 color M FLAER CD14 CD33 CD45 4 color G+M FLAER CD24 CD14 CD33 5 color G/ M FLAER CD24 CD14 CD15/ CD33 CD45 5 color G+M FLAER CD24 CD14 CD15 CD33 6 color G+M FLAER CD24 CD14 CD15 CD33 CD45 Flaer在诊断及鉴别诊断PNH中作用 筛选微量PNH克隆（病例1-2） 鉴别“真假”PNH（病例3） 病例1 女性，20岁，主因“双下肢瘀斑50天，间断发热1月” 入院 现病史：入院前50天无明显诱因出现双下肢瘀斑，查血常规示白细胞2.87×109/L，血红蛋白86g/L，血小板5×109/L，于当地医院行髂骨骨穿示增生减低，红系比例明显减低；外周血CD59表达正常，考虑AA，予环孢素免疫抑制及雄激素促造血治疗，复查血常规白细胞1.7×109/L，血红蛋白52g/L，血小板9×109/L，无明显改善，间断成分血输注，为进一步诊治就诊于我院 入院后检查： 血常规：WBC 1.5×109/L，Hb 51g/L，Ret 0.62%，Plt 9×109/L 髂骨骨髓象：增生活跃，粒系17%，红系65%，巨核细胞16个，造血细胞形态无异常；胸骨骨髓象：增生重度减低，粒系12.5%，红系22%，巨核细胞0个，造血细胞形态无异常，小粒空虚，20%。 骨髓活检：增生减低 胆红素：正常 病例1 病例1 外周血CD59、CD55检测： 红细胞：CD59- 3.86%，CD55- 5.41% 粒细胞：CD59- 17.48%，CD55- 51.86% 病例1 外周血Flaer检测： 粒细胞： I型细胞 18.3% II型细胞 0.3% III型细胞 81.4% 单核细胞： I型细胞 23.1% II型细胞 2.5% III型细胞 74.3% 诊断：AA-PNH综合征 治疗：强的松 20mg Bid、环孢素50mg Tid免疫抑制及安雄、EPO、G-CSF促造血治疗 疗效：1月后复查血常规示WBC 9.33×109/L，Hb 53g/L，Ret 0.82%，Plt 50×109/L，转至当地医院继续治疗。 病例1 男性，26岁，主因“发现白细胞减少1年余，全血细胞减少7月” 入院 现病史：入院前1年余查体时发现WBC 减少3×109/L，余正常，未