_二级生物安全实验室.pptx

二级生物安全实验室上节回顾根据对所操作生物因子采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平分为一级、二级、三级和四级。一级防护水平最低，四级防护水平最高。分级生物危害程度操作对象一级低个体危害，低群体危害通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。二级中等个体危害，有限群体危害能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。三级高个体危害，低群体危害能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。四级高个体危害，高群体危害能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。二级生物安全实验室二级生物安全实验室，即P2实验室，相当于BSL-2实验室,主要用于初级卫生服务、诊断和研究，其实验对象的危害等级为二级（中等个体危害，有限群体危害）。现在各类实验室当中，P2实验室是使用最为广泛的生物安全等级实验室。诊断和卫生保健实验室（以公共卫生、临床或医院为基础的）必须设计成二级或二级以上生物安全水平。目录 一、进入规定 二、人员防护 三、实验室设备（生物安全设备） 四、实验室仪器设备使用规范 五、消毒和灭菌六、废弃物处理一、进入规定一、进入规定1、所有的二级生物安全实验室入口处有生物危害标识、授权人员方可进入警示语、生物危险级别、危险因子、责任人、紧急联系电话等信息。2、实验室的门应保持关闭。二、人员防护二、人员防护1、进入实验室应穿防护服、工作时应带口罩和帽子等。2、操作感染性材料或接触污染容器要佩戴手套；手套使用前要进行气密性检查，手套用完后先消毒再摘除，随后洗手；接电话、开门或离开实验室时摘除手套。3、实验室内不得穿露脚趾的鞋，工作鞋为舒适、防滑、不渗液体的平底鞋，当从事可能漏出的操作时可穿防水鞋。4、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。三、实验室设备三、实验室设备生物安全设备避免的危害生物安全柜气溶胶和喷溅移液辅助器由于口吸产生的危害微型接种环加热器、一次性接种环较少生成气溶胶手动或自动的高压灭菌器感染性物质（以保证丢弃或重复使用时的安全)螺口盖试管及瓶子产生气溶胶和泄漏一次性巴斯德塑料移液管尽量避免使用玻璃制品四、实验室仪器设备使用规范实验室工作的开展离不开各种仪器设备的使用。不正确使用：有害物质的泄漏、个人伤害甚至发生实验室感染。实验室仪器设备的规范使用是保证实验室生物安全的关键环节之一。 仪器管理文件 标准操作程序（SOP）4-1.生物安全柜的使用（1）安全柜内不能使用本生灯，否则燃烧产生的热量会干扰气流并有可能损坏过滤器。允许使用微型电加热器，但最好使用一次性无菌接种环。（2）在安全柜内的工作开始前或者结束后，安全柜的风机应至少运行5min。（3）操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。（4）在安全柜内操作时，不能进行文字工作。4-2.离心机的使用良好的离心操作技术和牢固加盖的离心管可以提供足够的保护，以防止感染性气溶胶和可扩散粒子的产生。4-3.匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器的使用（1）实验室不能使用家用（厨房）匀浆器，因为他们可能泄漏或释放气溶胶。使用实验室专用搅拌器和消化器更为安全。（2）在使用匀浆器、摇床和超声处理器时，建议使用塑料容器，尤其是聚四氟乙烯容器。（3）使用匀浆器、摇床和超声处理器时，可在生物安全柜内覆盖塑料罩进行操作。（4）操作结束后，应在生物安全柜内打开容器。五、消毒和灭菌五、消毒和灭菌消毒：杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其孢子。灭菌：杀死和/或去除所有微生物及其孢子的过程。比较项作用强度消灭微生物数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分微生物不能灭菌强烈全部微生物能五、消毒和灭菌（1）清洁：除去污垢、有机物和污渍。（刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水和洗涤剂的湿墩布托擦。） 必须通过预清洁才能实现消毒和灭菌的目的。许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。预清洁时必须小心，以免暴露于感染性物质。五、消毒和灭菌（2）化学杀菌剂：含氯消毒剂、甲醛、戊二醛、乙醇等。（3）清除局部环境的污染：需要联合应用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、设备和用具的污染。（4）清除生物安全柜的污染：（5）洗手/清除手部污染（大多情况下：普通肥皂和水冲洗；高危情况下：杀菌肥皂。）五、消毒和灭菌（6）热力消毒和灭菌 加热是最常用的清除病原体污染的物理手段。“干”热没有腐蚀性，可用来处理实验器材中许多可耐受160℃或更高温度2~4h的物品。燃烧或焚化也是一种干热方式。高压灭菌的湿热法则最为有效。 高压蒸汽灭菌是清除污染时的首选方法。五、消毒和灭菌高压蒸汽灭菌器五、消毒和灭菌拓展：湿热灭菌仪器设备应用高压蒸