荧光光谱法在药物分析中的应用资料.docVIP

荧光光谱法在药物分析中的应用 摘 要：综述了荧光光谱法在药物分析中应用的研究进展，主要评述了几种常用的测定药物的荧光分析法，从机理角 度详细阐述了利用荧光光谱法如何研究蛋白质、核酸等生物大分子与药物小分子的相互作用，并给出该方法在药物分析中 应用的发展方向’ 关键词：药物分析；荧光光谱分析法；蛋白质；核酸 药物的荧光分析法进展 常用的药物分析方法有重量分析法［1］、滴定分析法［2］、色谱分析法（包括柱色谱法、纸色谱法、薄层色 谱法、离子交换色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、固相微萃取、高效毛细管电泳等） ［3-10］、光化学分析 法（包括红外和紫外 ? 可见分光光度法、荧光光谱法、化学发光法、磷光分析法、原子吸收光谱法、质谱法、 共振光散射等） ［11-18］、电化学分析法［19］等’荧光法以其灵敏度高、选择性好、操作简便等优点受到分析工作 者的青睐’将荧光光谱分析法应用于药物分析，已在药物有效成分分析鉴定、药物代谢动力学研究、临床药 理与药效分析等方面取得长足发展［20-21］，并广泛应用于生化分析、生物医学、临床分析等领域的痕量分析［22-25] 常规荧光分析法最早被应用于分析抗疟疾药物奎宁［26］、随着荧光分析法的发展，其应用范围日益扩 大，被广泛用于抗菌素药物、止痛药、镇静剂、止血药等的分析［26］，涉及合成药物、生物药物和天然药物’由 于自身具有发射荧光特性的物质相对较少，并且受到拉曼峰和散射光等背景的干扰，常规荧光分析法在药 物分析中的应用受到限制’为使荧光分析法的应用更加广泛，发展了各类荧光分析方法，如对不发荧光的物质可通过某类化学反应使其转变为适合测定的荧光物质［27-28] ， 对荧光较弱的物质可采取荧光增敏分析法［29-30］。近年来，还发展了各种新型荧光分析技术，如激光诱导荧光法［31］、同步荧光法［32］、导数荧光法［32］、 荧光探针法［33］、光化学荧光法［34]、时间分辨荧光法［35］、三维荧光法［36］、偏振荧光法［37］、荧光免疫测定法［38］、荧光成像技术［39］、荧光光纤传感器［40］等’这些技术的应用加速了各种新型荧光分析仪器的研制，使 荧光分析不断朝着高效、痕量、微观和自动化方向发展’ 常见的荧光分析法 2.1直接荧光分析法 直接荧光分析法适用于自身能产生荧光的药物’因荧光性质与溶液的pH值有关，故荧光强度的测定需在适宜的pH缓冲溶液中进行’对于成分复杂的生物供试品，为了防止干扰，有时需利用萃取、沉淀、色谱分离等方法除去干扰物，以降低荧光空白本底，提高分析灵敏度!已用于直接荧光分析法的药物有盐酸 洛哌丁胺、双水杨酯、左旋溶肉瘤素、叶酸等[41-44] . 2.2 胶束增敏荧光分析法 胶束增敏荧光分析法是在胶束溶液中进行的荧光分析法!胶束溶液对极性较小的弱荧光物质有增溶 作用，对荧光物质的荧光发射有增敏增稳作用；因此，对某些不发荧光或荧光很弱的药物无法进行直接荧 光分析法测定时，可通过加入某些增溶增敏试剂来增强药物的荧光，提高药物分析的灵敏度，如加入 CT-MVB,SDS,CPB,PVA,TritonX-100,Brij-35等表面活性剂及环糊精（α-CD,β-CD,γ-CD).由于主客体分子的结 构特征，以及温度、表面电荷及其它分子和离子等所形成的微环境，有利于形成胶束，胶束的存在，大大降 低了荧光分子的非辐射过程速率，而辐射速率常数改变不大；因此，量子效率增加，激发光寿命增长，客体 分子穿入、吸附和包络于胶束内外，使其行动受到限制，客体分子有效吸光面积、摩尔吸光系数增加，其激 发态也不易被溶液中的荧光熄灭体碰撞而获得保护，从而荧光增强[45],马红燕等[46].用胶束增敏荧光光度法对土霉素的测定作了研究!梁丽华等［47］用胶束增敏荧光法测定吡哌酸的含量.潘祖亭等利用表面活性剂、β-CD对药物荧光进行增敏作用，研究了左炔诺孕酮［48］、醋酸甲萘氢醌［49］、盐酸芦氟沙星［50］、醋酸泼尼松龙［51］、双嘧达莫［52］、吲哚美辛［53］等的荧光光谱.刘秀萍等［54］用竞争荧光包合法研究了维生素B6、β- 环糊精及其衍生物的包合性能!。 2.3 化学引导荧光分析法 化学引导荧光分析法是利用化学反应（氧化还原反应、络合反应、光化反应、化学衍生、颜色反应等）改变药物的荧光特性，使药物产生荧光或提高其荧光强度!潘祖亭等利用浓硫酸与无荧光药物作用后产生有 荧光的物质研究了醋酸甲地孕酮［55］、丙酸睾酮［56］、Gonzalez-Barreiro C等［57］用高效液相色谱分离、光化学诱 导荧光检测了一些废水中的中性和酸性药物.Al-Majed A A等［58］利用药物净他