第五章固相析出分离法分解.pptVIP

第五章 固相析出分离法 目标 掌握：盐析的原理及影响因素；有机沉淀的原 理、常用有机溶剂，等电点沉淀的机制 饱和溶液和过饱和溶液的概念 熟悉：盐析的操作过程和注意事项；有机沉淀 操作条件的控制，操作过程中应注意事项 结晶的一般步骤 了解：其他沉淀法 一、概述 1.定义——改变溶液条件使目标产物或杂质的溶解度降低而形成固体沉淀从溶液中分出的操作技术 析出物为晶体时称为结晶，析出物为无定形固体时称沉淀法 2.特点——浓缩倍数高、操作简便、经济、纯化倍数低 3.缺点：针对复杂体系而言，分离度不高、选择性不强 4、类型 盐析沉淀法 有机溶剂沉淀法 等电点沉淀法 高分子聚合物沉淀法 金属离子沉淀法 6) 结晶法 一般沉析操作的过程 Step 1 在经过滤或离心后的样品中加入沉析剂； Step 2 沉淀物的纯化，促进晶体生长； Step 3 离心或过滤，收集沉淀物； 二、盐析沉淀法 1.定义——是利用各种生物分子在浓盐溶液中溶解度的差异，通过向溶液中引入一定数量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀析出，达到纯化目的的方法。 ★盐析法应用最广的是在蛋白质领域，已有八十多年的历史,除了蛋白质和酶以外，多肽、多糖和核酸等都可以用盐析