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                5.4  基因突变的筛选与鉴定  p112 5.4.1 细菌营养缺陷型突变体的检出 5.4.2 真菌营养缺陷型突变体的检出 5.4.3 植物突变的检出 5.4.4 果蝇突变的检出 5.4.1 细菌营养缺陷型突变体的检出  影印培养法 5.4.2 真菌营养缺陷型突变体的检出 p112 * * 遗传					变异 遗传的物质基础   细胞学基础   分子基础  三大遗传基本规律   分离规律   自由组合规律   连锁遗传规律 数量性状   数量性状遗传 细胞质基因   细胞质遗传 不可遗传变异(环境变异) 遗传变异   重组(recombination) 等位基因分离与组合 非等位基因自由组合 连锁基因交换与重组   基因突变(mutation) 核基因突变 细胞质基因突变   重排(rearrangement) 染色体结构/数目变异 第五章 基因突变 5.1  突变的概念 5.2  基因突变的一般特征 5.3  基因突变与性状表现 5.4  基因突变的检出 5.5  突变的诱发及分子基础 5.6  DNA损伤修复与基因突变 诱变处理→完全培养基培养 基本培养基 补充培养基 影印 野生型(wild type)与原养型(prototroph) 野生型是指存在于自然界中没有经过基因突变,具有正常生化代谢功能的遗传类型 原养型指具有与野生型相同营养需求与表现的类型 营养缺陷型(auxotroph) 因基因突变丧失了某种生活物质合成能力,在基本培养基上不能正常生长,需加入相应营养成分的突变型 P112 影印培养法(Lederberg,1952) 完全培养基 补充培养基 基本培养基 图 5 - 3 Beadle, G. W.(1941)通过红色面包霉突变研究发现:基因是通过酶的作用控制性状表现,提出 “一个基因一个酶”假说(如图所示)    突变的诱发:   突变的鉴定: 1. 突变的真实性:在基本培养基上培养——  		  能够生长→未发生营养缺陷型突变  		  不能生长→可能发生营养缺陷型突变 2. 突变的类型(哪类型营养缺陷型突变?):  		  氨基酸?→(加入各种氨基酸)?不能生长  		  维生素?→(加入各种维生素)?能够生长 3. 进一步鉴定具体类型:  		  硫胺素(VB1)、吡醇素(VB6)、泛酸、肌醇 真菌营养缺陷型的检出   完全 培养基   基本 培养基   补充 培养基 真菌营养缺陷型的检出 红色面包霉生长突变的诱发和鉴定 p114 1941年Beadle 和Tatum用X射线照射获得许多红色面包霉生化突变型,其中3个突变型表现如下 : 突变型a: 提供精氨酸才能正常生长,否则就不能合成蛋白质。             这说明它丧失了合成精氨酸的能力。 突变型c: 在有精氨酸的条件下能够正常生长,但不给精氨酸而           只给瓜氨酸也能生长。说明它能利用瓜氨酸合成精氨酸。 突变型o: 在有精氨酸或瓜氨酸的条件下能够正常生长;但不给        这两种物质,而只给鸟氨酸也能生长。                       说明它能利用鸟氨酸最终合成精氨酸。          O        C        A 前驱物 →鸟氨酸→瓜氨酸→精氨酸→蛋白质     其中任何一个基因发生突变,精氨酸都不会合成  (一)突变真实性的鉴定    原始材料与变异体在一致的环境条件下种植(培育);    对两类个体进行性状考察与比较分析(进行方差分析);    根据试验结果进行判定: ★两类个体间没有差异?不可遗传变异(环境变异); ★差异仍然存在?存在真实差异为突变体。  分子水平鉴定方法: ★蛋白质产物的差异分析; ★ DNA(RFLP、RAPD等方法)。  (二)突变显隐性的鉴定 5.4.3 植物突变的检出 p114   ①一般测定突变频率的方法是根据M2出现的突变体占观察总个体数的比例来估算的      如,在M2的10万个观察个体数中出现5个突变体,表示突变频率为0.5/10000 ②利用花粉直感现象                                             X                            ♀ susu × SuSu ♂                                     ↓                                  2/20000为甜粒 (三)、突变频率的测定 动物基因突变的筛选与鉴定 动物基因突变的鉴定应用交配的方法来鉴定。  人类基因突变的检出是比较复杂的,而且不易鉴定,主要靠家系分析和出生调查。  图5-6 一个上睑下垂显性突变的家系分析  p116 5.4.4 果蝇突变的检出       
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