第十七节 因工程及其应用.docVIP

　　 基因工程及其应用 主讲：黄冈中学生物高级教师　童金元 一、基因工程的原理 　　基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。 　　原理：基因重组。 　　操作水平：DNA分子水平。 　　操作环境：生物体外。 　　结果：定向地改造生物的性状，获得人类所需要的产品（品种）。 1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 　　例如：大肠杆菌（E.coli）的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 　　什么叫黏性末端？ 　　被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 2、基因的针线——DNA连接酶 　　DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，这样一个重组的DNA分子才能形成。 3、基因的运输工具——运载体 　　要让一个从甲生物细胞内取出来的基因（如抗虫基因），送入受体细胞（如棉细胞），还需要有运输工具，这就是运载体。 　　常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒。 　　大肠杆菌的质粒： 　　最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内进行。 4、基因工程基本步骤 　　（1）获取目的基因 　　基因工程的第一步，是取得人们所需要的特定基因，也就是目的基因如抗虫基因，抗病基因、种子的贮存蛋白基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等都是目的基因。 　　（2）目的基因与运载体结合 　　用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 　　（3）将目的基因导入受体细胞 　　（4）目的基因的表达和检测 　　处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。 　　将每个受体细胞单独培养，检测是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的，保留有表达产物的进一步培养、研究。 二、基因工程的应用 1、基因工程与作物育种 　　1993年，中国农业科学院的科学家成功地培育出了抗棉铃虫的转基因抗虫棉，抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白质晶体，能使棉铃虫等鳞翅目害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物，使作物自身具有抵御虫害的能力。 2、基因工程与药物研制 　　许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。 　　微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。 　　胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 　　将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素，使其价格降低了30%-50%！ 三、转基因生物和转基因食品的安全性 　　当人类拥有了只有大自然才拥有的改造生物、创造生物的能力时，也感到了不安与困惑。人类是否有权按照自已的意愿操纵地球上的生命？人类创造的转基因生物、转基因食品是否会危害整个生物圈，包括人类自身？ 　　讨论：转基因食品安全吗？ 课堂训练 例1、要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（　） ①限制酶　　　②连接酶　　　③解旋酶　　　④还原酶 A．①②　　　B．③④　　　　C．①④　　　　　D．②③ 答案：A 例2、采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确的是（　） ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，并进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中 A．①②　　　　B．②③　　　　C．③④　　　　D．④① 答案：C - 返回 - 　　 同步测试 一、单项选择题 1、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（　C） A．人工合成基因 B．目的基因与运载体结合 C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测和表达 2、下列属于利用基因工程技术培育的新品种的是（B） A．耐寒的小黑麦　　　　　　　B．抗棉铃虫的转基因抗虫棉 C．太空椒　　　　　　　　　　D．试管牛 3、基因工程