化学发光法胃蛋白酶原检测及临床意义解剖.pptVIP

化学发光法胃蛋白酶原检测及临床意义解剖.ppt

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一、胃蛋白酶原简介 1.胃蛋白酶原( pepsinogen,PG)是由胃部分泌的参与消化的胃蛋白酶的前体,通常约1%的PG可通过胃黏膜进入血液循环,可分为PGI和 PGII两种亚型。 2.血清胃蛋白酶原可以较为准确地显示胃黏膜的状态和功能。 血清PG含量与良、恶性胃溃疡的鉴别有关,血清PGⅠ水平与萎缩性胃炎、PGⅠ/PGⅡ水平与胃癌、胃癌前期病变呈负相关。血清PGⅠ与胃泌酸腺细胞功能相关,PGⅡ与胃底粘膜病变的相关性较大,血清PG反映胃总体分泌PG水平。 二、化学发光免疫技术简介 1.化学发光免疫技术:集灵敏度的化学发光分析和特异性的抗原抗体免疫测定于一体的检测技术。 特点: 特异性强、灵敏度高、检测简便、快速、试剂五毒、安全稳定、可自动化。 2.前几年对血清PG的主要检测技术有:免疫比浊法和酶联免疫法,但这两种方法都只能定性,准确率不高,而且操作步骤繁琐、耗时长。 3.采用化学发光光方法检测诊断,通过抗原与抗体发生特异性结合,形成抗体-抗原-抗体-HRP复合物,并通过洗板除去干扰物质,利用酶催化化学反应释放的自由能激发中间体,从基态回到激发态,能量以光子的形式释放,最后通过化学分析仪读出数值,快速、准确、灵敏度高、特异性好,50min~2h内出结果。 三、胃部疾病检测对比 1、胃部疾病临床检测对比 2.胃部疾病检测方法学对比 四、胃蛋白酶原(化学发光法) 1.检验原理(以PGⅠ为例): 采用双抗体夹心化学发光法。PGⅠ单克隆抗体包被化学发光微孔板,形成固相抗体。检测时向包被微孔中加入血清样品或校准品,与HRP标记的PGⅠ单克隆抗体进行反应,形成抗体-抗原-抗体-HRP复合物。反应后洗去未结合的HRP-PGⅠ单克隆抗体,然后加入发光底物,检测发光信号的强度,发光值强度与样本中PGⅠ的含量成正比。 2.检验操作流程: 3.美凯生物化学发光法检测胃蛋白酶原的特点说明及优势: (1)精确定量、高灵敏度、少假阴性; (2)检查简单易行,可在短时间内得出检测结果; (3)胃癌普查初筛指标,发现率高,早期占90%; (4)可查出X线难以发现的胃部肿瘤或异常增生; (5)可了解胃粘膜萎缩程度; (6)非侵入无痛苦,适用人群广泛; (7)只需要2毫升血液就可以进行检测; (8)临床试验数据充足,与其他检测方法相关性良好。 4.结果分析 * * * * * 胃蛋白酶原 I/II ( PG I/II ) 定量检测试剂盒(化学发光法)检测及临床意义 检测手段 优点 缺点 总体评价 胃镜 金标准 痛苦, 受医生水平影响大,费用高不适合普查 具有侵入性,价格高不易普及 钡餐 造影 检测时间短,作为传统的胃癌普查手段 射线,费用高,不能明确疾病性质依赖经验,受检人群混杂及阳性患者难以随访等问题。对早期胃癌判定无力 对诊断进展期胃癌或弥散型胃癌更有价值 肿瘤相关 标记物 血清检测,无创伤、 广泛认知 对胃癌检测的特异性低,对早期胃部疾病的诊断无参考价值。 CEA 在胃癌胃液中 阳性率50%,血清阳性率仅为4.5% C13尿素酶 呼吸试验 快捷方便,操作简单 仅检测幽门螺旋杆菌感染 胃蛋白 酶原检测 血清法、定量准确、高灵敏度、准确率、快捷方便、适用广泛 可成为胃肠镜检查前的第一线胃癌筛查方式,操作简单,易普查。 方法学 检测原理 操作步骤 反应模式 线性范围 干扰因素 检测结果 酶免 抗原抗体反应 繁琐 两步法 较窄 显色易受干扰,本底高,灵敏度低 定量 免疫比浊 抗原抗体反应 简单 一步法 窄 浊度易受干扰,灵敏度低 定量 时间分辨 抗原抗体反应 简单 一步法 宽 荧光易受环境影响,操作要求高 定量 化学发光 抗原抗体反应 简单 一步法 较宽 无 定量 序号 PGⅠ65μg/L PGⅡ15μg/L PGR7.5 提示诊断 相关建议 1 正常 正常 正常 正常 半年或一年体检,动态监测胃健康状况。 2 正常 15~30μg/L 正常或3 幽门螺杆菌前期感染胃、十二指肠轻度溃疡浅表性胃炎 1、建议进行幽门螺旋杆菌(HP)检测,异常者遵医嘱。2建议3~6月复检。仍异常者医院就诊。 3 30~65μg/L 正常或30μg/L 正常或3 轻度萎缩性胃炎轻度胃粘膜溃疡药物、食物影响 1、规律膳食,禁酒、刺激性食物。2、在医生指导下服用调理治疗、健胃药。3、1月后复诊,异常者医院就诊。 4 30~65μg/L 30μg/L 3~7.5 幽门螺杆菌中期后感染中度胃炎、胃溃疡药物、食物影响 1、规律膳食,禁酒、刺激饮食。2、在医生指导下服用调理、治疗胃病的药。3、1月后复诊,仍异常者医院就诊。 5 30μg/L 正常或30μg/L 3~7.5 中重度萎缩性胃炎胃

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