第8章细胞培养.pptVIP

2.1.2 特点 培养基体积固定 培养过程中，细胞生长，其数目不断发生变化，呈S增长。 必须适当搅拌 2.1.3 继代的方法和最佳时期 继代方法： 用注射器或移管吸取一定量的含单细胞和小细胞团的悬浮培养物，并移到含有新鲜培养基的培养瓶里，继续进行培养。 2.1.4 细胞生长曲线 在整个培养过程中，细胞数目不断发生变化，呈现出明显的由慢到快，再到慢，最后增长停止的细胞周期。细胞的生长呈S型曲线 观察细胞染色体 在对数生长期 特点： 有利于有毒物质的扩散； 有利于气体交换； 不利于定点观察； 单细胞生长、分裂后，难以得到单细胞系。 2、固体平板培养法 2-1 含义及用途： 含义： 是将单个细胞与融化的琼脂培养基均匀混合后平铺一薄层在培养皿底上的培养方法。该方法是Bergmann(1960年)首创。 用途：是为了分离单细胞无性系，研究其生理、生化遗传上的差异而设计的一种单细胞培养技术。广泛应用于细胞、原生质体及融合产物的培养。 （3）制平板：细胞悬浮液与融化状态（35 ℃ ）条件培养基按一定比例均匀混合，倒成平板，盖上培养皿盖。用封口膜封严培养皿。 (4) 培养： 26℃置暗处培养21天。低倍显微镜观察， 记数单细胞或小细胞团，计算置板效率（也称植板率）。 植板效率（或植板率）：已形成细胞团的百分数（即每100个铺在平板上的细胞中有多少