土壤条件对固定化漆酶反胶团修复DDT污染土壤的影响试验研究.docVIP

土壤类型与污染浓度对漆酶修复DDT污染土壤的影响 赵月春1，付蓉1，莫测辉2*，易筱筠3 1. 华南农业大学应用化学系，广州 510640；2. 暨南大学环境工程系，广州510632；3. 华南理工大学环境科学与技术系，广州 510640 具有难降解、高残留特征的DDT至今在土壤中仍有残留，对农产品安全和人体健康有严重影响。本文采用批实验的方法研究了3种不同类型土壤和3个污染水平对漆酶修复DDT污染土壤的影响。研究结果表明，不同类型土壤中DDT各组分及总量（DDTs）的降解率存在显著差异，总体上为水稻土＞菜园土＞赤红壤，对照处理土壤中DDTs的降解率仅为20左右，加酶处理土壤中则高达50～65％。对于不同污染水平的DDT污染土壤，土壤中DDT各组分及DDTs的降解率均随着污染水平的提高而增大，多数在不同污染水平之间差异显著。对照处理对不同污染水平土壤中DDTs的降解率仅为15左右，而加酶处理则高达43.60～50.53％。 土壤污染修复；土壤类型；漆酶；DDT；污染水平中图分类号：X53 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（200）0-0611-04有机氯农药DDT作为一种高效的杀虫剂曾被广泛使用。DDT具有高毒、高残留、持久性和生物蓄积性等特征，对生态环境和人体健康有严重危害[1]，是2001年联合国环境规划署（UNEP）通过的《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》中要求全球统一行动优先控制和消除的12种持久性有机污染物（POPs）之一。尽管中国早在1983年就停用DDT，但各地土壤中其检出率仍然很高，一些地方甚至超标较严重。2000年太湖流域农田土壤DDT超标率达24%，上海市郊区农田土壤DDT含量严重超标[2]，南京市菜地土壤DDT检出率100%[3]。我国农药污染土壤面积hm2。土壤农药污染直接导致农产品中农药超标。据2000年国家质检总局数据，全国约50％的蔬菜农药残留超标，影响出口创汇金额达74亿美元[2]。一些农产品中的DDT检出率高达100%[4]。因此，需要对DDT污染土壤进行修复，以确保农产品安全和人体健康。 Tab 1 Physical-chemical characteristics of experimental soil g·kg-1 土壤类型 质地 酸度pH (水土=2.51) N P K 有机质 赤红壤 粉沙质壤土 5.35 0.71 0.72 2.61 7.89 菜园土 粉沙质粘壤土 5.33 1.39 1.84 18.54 13.50 水稻土 粉沙质壤土 6.15 1.32 0.38 15.60 25.72 近年来人们采用物理、化学和生物等不同方法对DDT污染土壤的修复进行了一些研究。如生物通气和热处理等物理方法[5]，试剂氧化[6]、金属还原去氯[7]和光降解[8]等化学方法。但物理和化学方法通常具有成本高、破坏土壤理化性质和造成二次污染等缺陷。而生物修复技术因具有成本低、无二次污染、不破坏土壤环境等特点而日益受到重视。国内外很多学者采用植物和微生物的方法对DDT污染土壤进行生物修复，如Arisoy和方玲等研究了DDT污染土壤的微生物修复技术[9,10]，Garrison、Suresh和魏峰等研究了DDT污染土壤的植物修复技术[11-14]。但植物修复需要的时间可能过长；同时微生物修复存在接种微生物与土著微生物的竞争问题，接种微生物更多地是用土壤本源有机物而不是污染物作为底物的问题，以及在污染物浓度较低时修复效果欠佳问题等。而酶修复技术对低浓度农药等有机污染物则具有较好的修复效果[15,16]。本文探讨了漆酶在不同土壤类型和不同土壤污染水平下对DDT污染土壤修复效果的影响。 供产漆酶的多孔菌购自中国科学院广州化学有限公司。4种DDT组分P, P’-DDE、O, P’-DDT、P, P’-DDD和P, P’-DDT的标准物质购于美国Supelco公司。供试土壤类型包括菜赤红壤、菜园土和水稻土，前者取自华南农业大学树木园，后两者取自华南农业大学农场，在室内风干后过2 mm筛备用，其基本理化性质见表1，DDT均未检测出（检出限见下文）。 将多孔菌接种到以甘薯粉作碳源的好气纤维分解菌固体培养基上活化，等菌种布满培养皿表面时用10 mm的打孔器接种到马铃薯液体培养基中，每50 mL培养液接入一片，放入28 ℃转速为130 r·min-1的恒温摇床培养9 d后离心，取上清液即得漆酶液。经盐析和Sephadex G-75柱层析纯化进一步提高其活力[17]。以邻联甲苯胺为底物，与漆酶液反应30 min，在756MC型紫外可见分光光度计上测定其600 nm处的光密度（OD值）。酶活力以酶与底物反应30 min后光密度的改变值表示