细胞培养常用技术.docVIP

细胞培养常用基本技术一、 常用设备 1．准备室的设备： 双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品柜（放置消毒过的物品）、包装台。2．配液室的设备： 扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液时搅拌溶液）。 3．培养室的设备： 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80）、空调、二氧化碳气瓶、书台（书写实验记录）。必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4冰箱（放置serum和培养用液）。二、无菌操作 1．无菌室的灭菌：??（1）定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5％过氧乙酸擦拭。??（2）CO2培养箱灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射 （3）实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟 （4）实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。 2．实验人员的无菌准备： （1）肥皂洗手。 （2）穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋 （3）用75％酒精棉球擦净双手。 三、无菌操作的演示??1．凡是带入超净工作