专题1《基工程》专题复习课件.pptVIP

1. 载体的必要条件 能自我复制，或能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； 有一个至多个限制酶切割位点 具有某些标记基因 1、从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库. 3. 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核 苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），放入DNA扩增 仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷 酸的个数是 A．540 个 B．7560个 C．8100 个 D．17280 个 C 540×（24－1）=8100 基因工程的应用 抗病　 抗逆　 生长速度 品质 药物 器官移植 * 基因工程专题复习 一、基因工程的基本操作工具 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。 1、来源： 2、作用： 3、结果： 形成两种末端 “分子手术刀” ——限制酶 黏性末端 平末端 G A A T T C G C T T A A A A T T C G 限制酶切割ＤＮＡ分子示意图 C T T A A G 黏性末端 黏性末端 什么叫平末端？ 1、下列关于限制酶的说法正确的是（ ） A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键 B 2.右图为DNA分子结构示意图，对该图的正确描述是 A．④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸 B．解旋酶作用的部位是⑨ C．某限制性核酸内切酶可选择⑨处作为切点 D．DNA连接酶可连接⑩处断裂的化学键 BD “分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶 １.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。 E·coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 ２.DNA连接酶的种类 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？ 连接部位 DNA连接酶 DNA聚合酶 连接DNA链 相同点 双链 单链 在两DNA片段之间形成磷酸二酯键 将单个脱氧核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成磷酸二酯键 都能形成磷酸二酯键 形成单链 DNA分子 形成新的DNA分子 形成重组DNA分子 形成黏性末端或平末端 作用结果 将DNA 两条链之 间的氢键 打开　　 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 切割目的基因及载体，能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 作用特点 碱基对间 的氢键 磷酸二 酯键 磷酸二 酯键 磷酸二 酯键 作用部位 DNA 分子 脱氧核苷酸 DNA分子 片段 DNA分子 作用底物 解旋酶 DNA 聚合酶 DNA连 接酶 限制酶 种类 项目　　  “分子运输车” —载体 2.常用的载体：质粒、噬菌体和动植物病毒。 二、基因工程的基本操作程序 基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 (一)、目的基因主要是______________________ 编码蛋白质的结构基因 请举例 （二）、获取目的基因的常用方法有哪些? 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 基因文库 基因组文库 部分基因文库 （如:cDNA文库） 基因文库 怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢? 依据：目的基因的有关信息 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性 ④从基因文库中得到目的基因的方法 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ③条件：___________、_______________、___________ 、 ___________ . ②原理：__________ 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 模板DNA 四种脱氧核苷酸 DNA引物 热稳定DNA聚合酶 2.利用PCR扩增目的基因 ④过程 a、变性（90℃-95℃）：双链DNA模板 在热作用下，_____断裂，形成___________ b、复性（复性55℃-60℃）：系统温度降低，引