中国药典与英药典微生物限度比较.pptVIP

中国药典与美英药典微生物限度检查法的比较 苏德模 2.检验量 CP 取10g或10ml供试品 BP、USP 10g或10ml供试品数份 谢 谢! * 1.收载的检查项目 ? CP BP USP 需气菌 + + + 真菌 + + + 大肠埃希菌 + + + 沙门菌 + + + 铜绿色假单胞菌 + + + 金黄色葡萄球菌 + + + 梭菌 + + ? 大肠菌群 + + + 肠杆菌科及其他某些革兰阴性杆菌 ? + 肠道菌、肠杆菌科 支原体 ? + ? 分枝杆菌 ? + ? 病毒的其他因子 ? + ? 活螨 + ? ? ? CP BP USP 一般制剂 0.9%的氯化钠溶液pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 乳糖肉汤 pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 其他合适培养基 pH7.2磷酸盐缓冲液, 大豆酪蛋白消化培养基, 乳糖液体培养基 非水溶性的制剂（膏剂、油剂） 司盘80、单硬脂酸甘油酯、 吐温-80 十四烷酸异丙酯 5克吐温-20或吐温-80 十四烷酸异丙酯 吐温-20 其他助溶剂 其他 不溶于水的膜剂 肠溶胶囊制备 供试液最终pH调至7.0 气雾剂制备法 样品加稀释剂至培养基时间不超过1hr 3.供试液制备 ? 4.制剂抑菌作用的确定（阳性对照试验） * 0.4%l卵磷脂，4.0%吐温 ? CP BP USP 控制菌阳性菌加量 10~102个 102个 105~106个 需气菌及真菌计数 50~100 回收率大小于70%判断是否有抑菌作用 25~200个金葡、白念、枯草、大肠菌在有无制剂存在下生长的稀释级差别大小判断是否有抑菌作用 根据控制菌阳性菌生长的结果判断 ? 抑菌作用处理方法 ? ? ? 中和法 + + +* 稀释法 + + + 薄膜过滤法 + + + 离心沉淀法 + ? ? 5.需气菌和真菌计数 ? CP BP USP 方法 ? ? ? 平皿法 + +（浇碟、涂抹） + 试管法 ? + + 薄膜过滤法 + + ? 培养基 营养琼脂 大豆酪蛋白消化琼脂 大豆酪蛋白消化琼脂 玫瑰红钠琼脂 含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂 沙氏葡萄糖琼脂 5.需气菌和真菌计数(续) 稀释级的选择 3个连续稀释级 1个 2个 培养温度 30~35℃23~28℃ 30~35℃20~25℃ 30~35℃20~25℃ 培养时间（天） ? ? ? 需气菌 2(5~7) 5 2~3 真菌 3(5~7) 5 5~7 计数结果 ? ? ? 需气菌 真菌 一般30~300 30~100 不生长按〈10个/1g或ml报告 〈300 〈100 30~300 不生长按〈10个/1g或ml报告 结果报告 1g或ml 1g或ml 1g或ml 6.大肠埃希菌 ? CP BP USP 方法 MI法 I法 IMViC法 检验量（g或ml） 1 1 10 稀释剂 09%氯化钠溶液 pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 乳糖液体培养基 预增菌 ? 大豆酪胨肉汤35~37℃18~48h ? 增菌 BL增菌培养基 35~37℃18~24h M-I 35~37℃5、24h Mac 肉汤43~45℃18~24h 乳糖液体培养基 35~37℃24~48h 分离 Mac.琼脂平板 35~37℃18~72h Mac、EMB琼脂平板 35~37℃24~48h 生化试验 MI及IMViC + + ? 7.大肠菌群 ? CP BP USP 检验量（g或ml） 1 1 ? 稀释剂 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 乳糖肉汤 ? 预增菌 ? 35~37℃2~5h ? 增菌 0.1g,0.01g0.001g BL培养基 35~37℃18~24h 0.1g,0.01g,0.001g 乳糖肉汤培养基 35~37℃24~48h ? 分离 EMB或Mac.C琼脂平板 35~37℃ 18~24h VRB.琼脂平板 35~37℃ 18~24h ? 生化试验 + - ? 8. 铜绿假单胞菌 ? ? CP BP USP 检验量 1 （g或ml） 1 （g或ml） 10 （g