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大肠杆菌和门氏菌的血清学检验
实验十二 大肠杆菌和沙门氏菌的血清学检验 实验目的 1.了解细胞凝集实验的原理； 2.学习并掌握大肠菌群血清学检验的方法； 实验原理 抗体和抗血清：抗体(antibody)指机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。抗血清（antiserum）是一种含有多克隆抗体的血清。 凝集反应： 颗粒性抗原(如细菌、红细胞或表面带有抗原的乳胶颗粒)与相应抗体结合，在一定条件下可形成凝集团块的现象。 在细菌总菌落数计数和大肠菌群计数基础上，运用血清学检验，能更好地将样品中的细菌进行鉴定。 实验器材 1.培养基：牛肉膏蛋白胨斜面固体培养基（琼脂为1.5%）； 2. Eppendorf离心管，Tips，微量加样枪； 3.无菌生理盐水，250ml三角瓶（灭菌处理），灭菌培养皿。 4.兔抗大肠杆菌、沙门氏菌血清 实验步骤 一、菌悬液的制备 将5mL无菌生理盐水分别加入大肠杆菌和沙门氏菌的斜面试管中。用接种环轻轻刮取并震荡数次，制成菌悬液。 二、大肠杆菌、沙门氏菌抗原性检测 事先将干净载玻片做上标记，取10倍稀释的大肠杆菌抗血清和沙门氏菌抗血清，各50uL于载玻片上。然后，分别加入大肠杆菌和沙门氏菌的菌悬液各50uL。放置于空培养皿中，于37度保温15-20分钟 大 沙 大肠杆菌菌悬液 沙门氏菌菌悬液 大 沙 待测1菌悬液 待测2菌菌悬液 沙门氏菌菌悬液 大 + — + 生理盐水 大 空白对照 温育15-20min后，检查是否有颗粒状沉淀，并对照阳性、阴性和空白，判断分析待测菌的种类 大 沙 待测2菌悬液 待测1菌菌悬液 微生物实验课到此全部结束 谢谢大家参与！
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