实验检测生物组织中的糖类、蛋白质、脂肪ty讲课.ppt

一.实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： ①.还原性糖的鉴定： 还原性糖+ ②.脂肪的鉴定： 　　　 脂肪+ 脂肪+ 　　　 ③.蛋白质的鉴定： 蛋白质+ ④淀粉 + 斐林试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ 橘黄色 苏丹Ⅳ 红色 双缩脲试剂 紫色 碘 蓝色 还原糖：分子中含有游离醛基的糖。 常见的有葡萄糖，果糖 麦芽糖 乳糖 半乳糖。 蔗糖 淀粉为非还原性糖。 斐林试剂 苏丹Ⅲ 橘黄色 红色 砖红色沉淀 紫色 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂 鉴定物质 试剂 实验现象 还原性糖 脂肪 蛋白质 淀粉 碘 蓝色 必修1第18～19页 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验原理 选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对 显色的干扰)，苹果、梨最好 。 实验流程(步骤) 1.可溶性还原糖 制备组织样液： 制浆：去皮、切块、研磨， 过滤：（用单层纱布） 取液：（２mL） 显色反应 现象： (用前混匀) 50～65.C水浴 加热2min 还原糖的检测结果 还原糖的检测和观察： 2.脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片 制片： ①选取最薄的薄片移至载玻片中央 ②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 － 3滴，染色 ２－３min ③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 (多余的苏丹Ⅲ ) ④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片 显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察 现象： 有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒 脂肪微粒 脂肪的检测结果 蛋白质的鉴定----双缩脲试剂 鸡蛋清溶液 NaOH 溶液 滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需摇匀 结果显示: 紫色 蛋白质的鉴定 选材与制备 组织样液： 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） ［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］ 显色反应 现象： 无色 紫色或紫红色 (创设碱性条件) (提供Cu2+) 蛋白质的检测结果 1.你的预测与实验结果是否一致？ 2.小组间交流实验结果。你有什么发现？ 3.全班共检测了多少种生物材料？这些生物 材料中有机化合物的种类、含量一样吗？ 这对我们选择食物有什么启发？ 讨论 4.淀粉的鉴定 取材：马铃薯匀浆 检测： 碘液2滴 现象： 摇匀后变成蓝色 蛋白质检测结果 淀粉检测结果 实验结果样图 问题探讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？ 作对照 2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 深化 比较项目 试剂及成分 原理 溶液浓度 方法 加热与否 结果 可溶还原糖的鉴定 斐林试剂NaOH和CuSO4 砖红色沉淀 蛋白质的鉴定 双缩脲试剂NaOH和CuSO4 溶液呈紫色 4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？ 新配制的 Cu(OH)2 溶液 在碱性 环境下 的Cu2+ NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.05g/mL NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.01g/mL 先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液混合， 而后立即使用。 先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量) 水浴 加热 不 需 要 5、实验的材料的选择和处理有什么要求？ 材料的选择 材料的处理 还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定 含糖高，颜色为 白色的植物组织， 如苹果和梨 富含脂肪的种子 ，如花生 浸泡3~4小时 / 蛋白质的鉴定 富含蛋白质的 黄豆或鸡蛋清 黄豆需浸泡1-2天，鸡蛋清要先稀释 淀粉的鉴定 马铃薯 / 各种可供实验的材料 梨 黄桃 胡萝卜 黄豆 花生种子 小麦种子 ①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ，理由是梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定? 。 ②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为