实验室仪器设备、器皿及用具讲课.ppt

* * * 瓶盖朝上放，接种完毕后立即盖好瓶口 正 确 错 误 接种完一瓶用火烧用具以防止交叉污染产生 配方成分 弱液 次强液 强液 常用配方 重铬酸钾（g） 浓硫酸（ml） 蒸馏水（ml） 50 100 1000 100 200 1000 60 800 200 100 200 800 清洁液配方 实验员消毒 实验室、无菌台灭菌 实验器材的灭菌 无菌接种 消 毒 实验台卫生 培养室培养 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 恒温振荡培养箱 ?光照培养箱 5、细胞学鉴定设备 光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜 倒置显微镜 光学显微镜 1、玻璃器皿 三、培养器皿及实验用具 培养皿 三角瓶 培养瓶 2、金属材质用具 镊子 解剖刀 接种针 1、玻璃器皿洗涤 新购置玻璃器皿 1%稀HCl 浸渍12h 洗衣粉洗涤 清水冲洗 晾干备用 已用过的玻璃器皿 四、洗涤技术 清洗后器皿内外不可挂有水珠，否则重洗，若重洗后仍挂有水珠，则需用洗液浸泡数小时后（或用去污粉擦洗），重新清洗。 2、塑料用品洗涤 新的塑料器皿打开即用 已用过的塑料器皿 2%NaOH浸泡12h 清水冲洗 2%—5%盐酸浸泡30min 清水冲洗 蒸馏水冲洗 晾干备用 金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤（新的可以用热洗衣粉水洗净），需要清洗时，一般用酒精擦洗，然后火焰干燥。 3、金属用品洗涤 （一）、灭菌工作是极其重要的。 首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴：有菌：凡是暴露在空气中的物体，至少其表面都是有菌的。如植物的表面、超净工作台的台面，未处理的工具和手等。  无菌：高压高温处理（工具、器皿、培养基等）  物理或化学处理；  火烤后的物体；  健康的动植物不与内外部表面接触的组织  内部可能是无菌的（有时也有内生菌，但  不会影响培养，也不会污染） 五. 灭菌技术 1、物理方法：干热、湿热、过滤（0.25微米）紫外灯、超声波等。 2、化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、双氧水、福尔马林等。  五. 灭菌技术 干热灭菌 玻璃器皿、器械 湿热灭菌 培养基、蒸馏水、器械、棉塞等 熏蒸灭菌 接种室、培养室 过滤灭菌 液体培养基、蒸馏水 药剂灭菌 培养材料 烧灼灭菌 器械、瓶口、棉塞、包头纸 辐射灭菌 接种室、培养间 （一）各种灭菌方法及其使用范围  适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。操作方法：150℃ 、40min或120℃ 、120min，如果发现芽孢杆菌，160℃ 、90～120min （1）干热灭菌  适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121℃ 维持20～30min注意点：加足水、排尽气、气压降到0时，才能开盖。 （2）湿热灭菌  培养基的灭菌一般用高压高温处理，但如果培养基中某些成分遇到高温分解（如某些生长调节剂GA3、玉米素等），就需要过滤灭菌。另外酶、血清等也需要过滤灭菌。 灭菌方法：将生长调节剂或酶配成一定浓度，用注射器注入微孔滤膜虑，滤膜孔径0.22～0.45微米。制培养基时，现将培养基高压灭菌，待降至50℃左右时，加入适量的激素，然后分装。 （3）过滤灭菌 主要是利用紫外灯进行照射，适合实验室空气、操作台等，灭菌时间20～30min。注意：关灯后5min后再进入。超净工作台关灯后要打开风机。 （4）射线灭菌  用火焰灼烧达到灭菌目的，适用于接种器皿的灭菌。 （5）火焰灼烧灭菌 适用外植体、实验器皿、操作表面、皮肤等。几种常用消毒剂的效果比较 消 毒 剂 使用浓度(%) 消毒时间(min.) 效 果 残液去除难易 乙醇 70-75 0.1-3 好 易 新洁尔灭 10～20 5～30 好 易 氯化汞 0.1～1 2～15 最好 最难 过氧化氢 10～12 5～15 较好 最易 抗菌素 4～50mgl-1 30～60 较好 较难 次氯酸钙/纳 9 ～ 10 5～30 好 易 （6）消毒剂 长期不用的培养室或接种室要进行熏蒸。方法：甲醛、高锰酸钾熏蒸。 甲醛的用量通常按每立方米空间2-6毫升计算，高锰酸钾的用量是甲醛的一半。室内准备妥当后，把称好的高锰酸钾放在瓷碗或烧杯内(最好在碗或杯下面铺一张报纸，以