医学微生物第3、4章噬菌体遗传变异探讨.ppt

第3章 噬菌体的概念及特点 ★噬菌体是感染细菌、真菌、放线 菌或螺旋体等微生物的病毒； ★个体微小，可以通过细菌滤器； ★无细胞结构，主要由衣壳（蛋白 质）和核酸组成； ★只能在活的微生物细胞内复制增殖，是一种专性胞内寄生的微生物。 ★噬菌体分布极广。 第一节 噬菌体的生物学性状 1.形态与结构 蝌蚪形 微球形 细杆形 大多数噬菌体呈蝌蚪形。 结构：由头部和尾部组成； 化学组成：蛋白质与核酸； 核酸类型：为DNA或RNA，大多数DNA噬菌体的DNA为线状双链； 噬菌体具有抗原性； 抵抗力：比一般细菌繁殖体强。 第二节 毒性噬菌体 噬菌体可分为两种类型： 1.毒性噬菌体：能在宿主菌内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。 2.温和噬菌体或溶原性噬菌体：噬菌体基因组整合于宿主菌染色体中，不产生子代噬菌体，也不引起细菌裂解，但噬菌体DNA随细菌基因组的复制而复制，并随细菌的分裂而分配至子代细菌的基因组中。 噬斑：在固体培养基上，将适量噬菌体和宿主菌液混合接种培养后，培养基表面可出现透亮的溶菌空斑，每个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解宿主菌后形成的。 噬斑形成单位 前噬菌体：整合在细菌染色体上的噬菌体基因 溶原性细菌：带有前噬菌体的细菌。 溶原性：温和噬菌体具有产生成熟子代噬菌体颗粒和裂解宿主菌的潜在能力。 温和噬菌体有三种存在状态：游离的具有感染性的噬菌体颗粒；宿主菌细胞质内类似质粒形式的噬菌体核酸；前噬菌体。 溶原性转换： 某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变。例如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理 第四节 噬菌体的应用 1、细菌的鉴定和分型 2、检测标本中的未知细菌 3、基因工程的工具 4、细菌性感染的治疗 思考题 1.噬菌体的概念及其特征。 2.毒性噬菌体和温和噬菌体、前噬菌体、溶原性细菌、溶原性转换的概念及特征。 3.溶菌性周期与溶原性周期的区别。 第4章 BCG：牛型结核杆菌（有毒株） 胆汁-甘油-马铃薯培养 13年，230次传代 减毒株（BCG） 基因型变异：BCG 表型变异：细菌L型 第一节 细菌的遗传物质 细菌染色体：dsDNA，580～5220 kbp 复制快：105 bp/min 无组蛋白，无内含子，为连续基因 单倍体：突变后更易表现 质粒（plasmid）： 二、细菌基因组中主要的特殊结构 转座元件（转位，转座子，跳跃基因） 可在细菌或其它生物的基因组中改变自身位置的独特DNA序列。导致基因不稳定和高突变率。 保留性转位：转座酶原位切割再插入新位点 复制性转位：复制新的拷贝至新位点 插入序列(insertion sequence，IS): 数百至2000 bp 两端重复序列，与插入有关 中心序列有转位酶基因 转座子 (transposon，Tn): 2000~25000 bp 两端为IS 中心序列有与转位无关基因 如：毒素基因、耐药基因等 整合子（integron，In）： 定位于细菌染色体、质粒或转座子上 基本结构：两端为保守末端，中间为可变区，含一个或多个基因盒 整合子含有3个功能元件：重组位点；整合酶基因；启动子 通过转座子或接合性质粒，使多种耐药基因在细菌中进行水平传播 第二节 细菌基因突变 突变率：10-6~10-9 自发突变与诱发突变 突变与选择 回复突变与抑制突变 第三节 基因的转移和重组 转移：供菌提供DNA；受菌接受DNA 重组：受菌获得供菌DNA 转化（transformation）： 受菌主动摄取外源性DNA 供菌死亡时释放或人工方法提取DNA 影响因素： 供受菌基因型： 同源性；亲缘关系近，转化率高 感受态（competence）： 生理活动过程中摄取 转化因子的最佳时期 环境因素：Mg2＋、Ca2＋等可促进转化 转导（transduction） 噬菌体媒介 将供菌DNA转给受菌 分普遍性转导和局限性转导 接合（conjugation） 通过性菌毛将供菌DNA转给受体菌，受体菌获得供体菌性状 F质粒（fertility factor, 致育因子） 诊断困难 H→O变异：如伤寒沙门菌鞭毛 S→R变异：消失荚膜或多糖 抗原性改变