冰冻切片注意事项.pptVIP

如组织块温度太低，组织片容易卷曲和碎裂，此时可把大拇指置于组织块上几秒钟，升高组织块温度。 如组织块温度太高，组织片易皱褶，可将速冻台置于组织面上几秒钟以快速降温。 脂肪组织：因脂肪不会结冰，因此脂肪组织在制作冰冻切片时尤为困难。 解决办法：只有将温度降低，让脂肪变硬。如果是脂肪组织与非脂肪组织混合存在，温度可降至-25℃；如果是纯脂肪组织，则降至-50℃. 切片上有条纹：垂直于刀片上的细条纹，考虑是刀片缺口所致，可能是由于钙化组织、缝线引起；如出现宽条纹或组织缺损，则可能是由于刀片下粘附有组织残渣。 波浪线样的皱褶：可能是由于切片机内某个零件松动所致。检查支撑刀片的刀架，冷冻头等有无松动。 切片卷缩：常见原因 1:放卷板位置不正确/放卷板较脏/放卷板有缺口 2:切片刀温度不够低 3:切片刀钝/粘附有组织残屑 4:组织硬度不够 解决对策： 1:调整放卷板位置，使其切片可以顺畅通过 2:盖上冷冻室盖，让刀片温度降低 3:及时清洁刀片，更换刀口 4:降低组织块温度，使其硬度适当 5:用OCT/胶水包埋组织，有利于防止切片卷缩 切片脱落：常见原因 1:组织内坏死组织多 2:固定液温度低 3:载玻片不干净/温度低 4:切片太厚 解决对策： 1:取材时：尽量避免坏死组织，如必需取材，则可用酒精灯/电吹风将切片吹干防脱 2:定期更换固定液，将固定液瓶盖盖好，防止固定液挥发而使其浓度降低