实验六、农杆介导转化拟南芥.pptVIP

实验材料： 农杆菌GV3101重组菌株，重组双元表达载体pCAMBIA1300 ，拟南芥 试剂： YEB液体培养基，Kan（卡那霉素），Rif（利福平）； 转化介质 ：1/2 MS大量，1×铁盐，1×微量， 1×有机，5%蔗糖， 0.01μg/ml 苄氨基嘌呤(BAP)，0.03%silwetL-77，20 mg/L乙酰丁香酮，KOH调pH值至5.7。 1.1 简介： 拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种十字花科植物，二年生草本，高7～40厘米，花期3～5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究，已成为一种典型的模式植物，其原因主要基于这种植物具有以下特点： （1）形态个体小，生活力强,种子量大； （2）生长周期快，从播种到收获种子一般只需6--8周； （3）基因组小(2n=10)，是目前已知植物基因组中最小的，但是具有完成“复杂”的植物生长发育的所有基因； （4）拟南芥是自花授粉植物，易于获得纯合突变体。 1.2 拟南芥的培养： 将拟南芥种子经10%双氧水消毒后接种于MS培养基上，于22℃、光照10h培养1-2周，长出无菌苗后转移至坧石和土（3：1）混合物上培养。 注意： 湿度要大一些。 2.转化原理? 2.1 农杆菌对双子叶植物的创伤部位侵染广泛，在某些条件下对单子叶植物也有一定的感染性。 2.2 根癌农杆菌含有??Ti??(