基因工程的基本操作程序一轮总结.docVIP

基因工程 【学习目标】 1．理解基因工程的实质 2．理解基因工程操作的四步曲及其操作实例一．基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在水平上进行设计和施工的，又叫做。 二．基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开，具有专一性。 （3）结果：产生的DNA片段末端通常有两种形式： 。 2.DNA连接酶 两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）比较： ①相同点： 。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段互补的末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.载体 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中并稳定保存。 ②具有一至多个切点，供外源DNA片段插入。