基因的基本操作程序.pptxVIP

基因工程的基本操作程序一、创设情境 导入新课具有柠檬味的西红柿二、认真探究 掌握规律（一）请阅读课本第8页和第9页第一段，找出以下问题：1、基因工程中的目的基因指的是什么？2、获取目的基因常用的方法有哪些？要求：记忆并举手复述，有不同意见可 补充（二）阅读课本第9页选段：从基因文库中 获取目的基因，回答以下问题：1、记忆基因文库的概念和种类2、部分基因文库就是cDNA文库？3、如何从基因文库中得到所需要的基因？要求：独立思考，然后举手复述，有不同 意见可补充（三）阅读课本第10页：生物技术资料，思考并回答以下问题：1、如何构建基因组文库？构建过程需要 哪些酶？2、如何构建cDNA文库？该过程需要哪些 酶？3、找出cDNA文库和基因组文库的区别， 记忆并用自己的语言复述要求：先独立思考，然后举手发言，有不同意见可补充（四）阅读课本：利用PCR技术扩增目的基因，并 完成以下问题聚合酶链式反应1、概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 体外特定DNA片段DNA复制2、原理：__________指数2n3、方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）4、结果：使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增要求：独立思考，然后举手发言（四）请认真观看以下动画，并结合课本完成以下内容：PCR技术扩增的条件：_______________________、 ____________、___________ （前提）、 ___________已知基因的核苷酸序列特定DNA片段一对引物DNA聚合酶要求:先独立思考，再小组讨论，然后举手发言3、人工合成目的基因适用条件：目的基因小，已知目的基因的核苷酸序列逆转录法化学合成法目的基因的信使RNA蛋白质的氨基酸序列推测逆转录酶信使RNA序列单链DNA推测DNA聚合酶基因的核苷酸序列 双链DNA（目的基因)人工合成目的基因三、课堂巩固 拓展延伸1、下列属于获取目的基因的方法的是( )①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④D.①②④⑥D2、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是（ ）A、某生物的全套基因就是一个基因文库B、将含有某种生物不同的许多DNA片段，导入某个 生物 体内，则这个生物就是一个基因文库C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库C3、比较 PCR扩增技术和生物体内合成目的基因的异同点【不同点】： 1. 都以DNA为模板　2. 都以四种脱氧核苷酸为底物　3. 都要DNA聚合酶　4. 都需要解开双链为2条单链　【不同点】：1.PCR是DNA复制的体外扩增技术2.体内DNA复制半不连续复制，体外PCR连续复制　　3.体内DNA复制的聚合酶在高温时会变性，PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶）。4.PCR需要经历三十次循环使特定DNA片段放大数百万倍。5.DNA复制需要校对以保证忠实性，PCR不需要校对。6.引物不同：体内DNA复制需要RNA，而且体内引物要除去，PCR需要两个人工合成的DNA引物，不需要切除。　利用PCR技术扩增限制酶与运载体 连接导入与运载体 连接导入基因组文库的构建cDNA文库的构建某种生物某个时期的mRNA某生物体内全部DNA cDNA许多DNA片段DNA聚合酶双链DNA受体菌群体受体菌群体部分基因文库（cDNA文库）基因组文库反转录酶基因表达载体的作用：二、基因表达载体的构建——核心a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代b、同时使目的基因能表达和发挥作用思考：作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是：（1） 生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达；（2） 通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；（3） 目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记；（4） 为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等；（5） 有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。请阅读课本11页：基因表达载体的构建，思考并回答以下问题：1、基因表达载体包括几部分？2、各部分的作用分别是什么？3、回忆必修二基因表达载体的构建过程，