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2.2动物细胞培养和核移植技术
学习目标:
1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用
2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景
学习重难点:
1.动物细胞培养的过程及条件
2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
学海导航:
一、动物细胞工程包括: 、 、 、 等。
二、动物细胞培养:
(一)意义:是其它动物细胞工程的 。
(二)概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成 ,然后在适宜的培养基上,让这些细胞 和 。
(三)理论基础: 。
(四)过程:
说明:
1、动物细胞培养特点:生长时 、 。
细胞贴壁:在培养瓶中,悬液中分散的细胞很快就 在瓶壁上,称为细胞贴壁。
接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面 时,细胞就会 分裂增殖,这种现象叫做接触抑制。
2、分散成单个细胞的方法:剪碎、用 或 处理。
3、分散成单个细胞的目的:使细胞与培养液充分接触,便于吸收O2和营养物质,排出代谢废物。
4、原代培养:将动物组织消化后的 。(10代以内或分瓶之前)
5、传代培养: 的细胞继续培养。(10代以后或分瓶之后)
6、两次停止期:
(1)10代左右有些细胞不能传代,有些细胞继续传代这些存活的的细胞一般能传到40~50代,这种传代细胞称为细胞系。
(2)50代左右绝大多数细胞死亡,部分细胞 发生变化,获得 ,朝着等同于 的方向发展,无限增殖。这种传代细胞称为细胞系。
细胞株和细胞系的区别: 的遗传物质改变,具有 细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。而 的遗传物质没有改变。
思考:
1、幼龄与老龄动物组织细胞比较,分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较,哪一种更易于培养?为什么?
2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?
3、取出的动物组织如何就分散成单个的细胞?
4、细胞培养用胰蛋白酶处理说明细胞间的物质是什么成分?用胃蛋白酶可以吗?
5、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?
6、动物细胞培养要脱分化的过程吗?为什么?
7、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?
8、目前使用的或冷冻保存的细胞通常为几代以内的细胞?
(五)条件:
1、 、 环境。( 和 无菌处理;添加 ;定期更换培养液,以便清除细胞代谢产物)
2、营养:合成培养基成分有糖、_____________、促生长因子、无机盐、微量元素,通常需加入天然成分_________、 等。
3、温度和PH:适宜温度为_________±0.5℃;pH为_________~7.4。
4、气体环境:(1)O2:
(2)CO2:
(3)培养装置:用 或 ,置于95%空气加5%CO2的混合气体的 中培养。
思考:
1、什么叫合成培养基?使用时通常加入什么物质?为什么?
2、加入CO2 的作用是?
(三)、动物细胞培养技术的应用
(1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、 、单克隆抗体等。
(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。
(3)用于检测有 物质
(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据
★合作探究
植物组织培养和动物细胞培养的比较
植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 体 体( 培养基) 培养基特有成分 取材 培养结果 培养目的 相同点 均为 操作,需要适宜的 、 、 等条件 【当堂检测】
1、有关动物细胞培养的叙述中正确的是( )
A.动物细胞培养前要用胃蛋白酶使细胞分散
B.动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白
C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D.动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
2、动物细胞工程技术的基础是( )
A.动物细胞融合 B.胚胎移植 C.动物细胞培养 D.核移植
3、在进行动物细胞培养时,通常选用的培养材料是 ( )
A、衰老退化的动物组
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