2015基因工程教程范本.pptVIP

1、原核细胞基因结构： 2：真核细胞基因结构： 规律总结 几种酶的比较 * * 2015备考·最新考纲： 1．基因工程的诞生(Ⅰ) 2.基因工程的原理及技术(Ⅱ) 3.基因工程的应用(Ⅱ) 4.蛋白质工程(Ⅰ) 5.转基因生物的安全性(Ⅰ) 6.生物武器对人类的威胁(Ⅰ)。 第1讲　基因工程 选修三：现代生物科技专题 DNA分子 基因 非编码区： 调控序列 非编码区： 调控序列 编码区： 编码蛋白质 启动子： 启动转录 终止子：终止转录 RNA聚合酶结合识别位点 结构基因 mRNA 翻译 特定功能 的蛋白质 转录 原核基因特点： 编码区是连续的 DNA分子 DNA分子 基因 非编码区： 调控序列 非编码区： 调控序列 编码区： 编码蛋白质 启动子： 启动转录 终止子：终止转录 RNA聚合酶结合识别位点 结构基因 前体mRNA 翻译 特定功能 的蛋白质 外显子和内含子都转录 特点：编码区间隔不连续！分为内含子和外显子。 编码蛋白质 不编码蛋白质 剪切掉内含子 转录的部分 拼接外显子转录的部分 mRNA DNA分子 特别注意： 1、从真核生物直接获取的基因不能直接导入原核生物细胞中的原因：真核基因含内含子，不能编码蛋白质，若直接用真核基因，由于受体细胞（原核细胞）中无有关剪切、拼接前体mRNA的酶，所以不能表达。（ 如科学家将人生长素基因导入大肠杆菌并表达一般导入的是CDNA) 3、CDNA特点： 无启动子、终止子等非编码区序列； 无内含子序列； 加上调控序列后可以转基因到原核生物并表达。 2、CDNA----用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段。 提取mRNA 反转录 单链DNA 复制 双链DNA (CDNA) 4、外源基因和受体DNA拼接的理论基础?外源基因在受体内表达的理论基础 ①基本组成单位都是四种脱氧核苷酸 其空间结构都是规则的双螺旋结构 ②生物界共用一套遗传密码 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状（目的）。 基因工程的概念 原 理： 操作水平： 结 果： 体外 操作环境： 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的性状，获得 人类所需要的品种。 1.与杂交育种、诱变育种相比优点？ 2.该项技术所用到的工具有哪些？ 氢键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 作用部位 DNA分子 脱氧核苷酸 DNA片段 DNA分子 作用底物 解旋酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 限制酶 种类 项目　　 形成单链 DNA分子 形成新的DNA分子 形成重组DNA分子 形成黏性末端或平末端 作用结果 将DNA 两条链之 间的氢键 打开　　 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 切割目的基因及载体，能专一性识别双链DNA分子某种特定的核苷酸序列，且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 作用特点 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 第二节： 基因工程的基本操作程序 1、目的基因的获取 基因工程的基本操作程序知识框架： 2、基因表达载体的构建（核心） 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 目的基因概念： 方法： 组成： 目的： 将目的基因导入植物细胞的方法： 用DNA分子杂交法检测---转基因生物染色体上是否插入了目的基 因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。 将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射法 将目的基因导入微生物细胞的方法： 氯化钙处理受体细胞成“感受态”细胞 用分子杂交法检测---目的基因是否转录出了mRNA，这是检测目的 基因是否发挥作用的第一步。- 用抗体抗原杂交法检测---目的基因是否翻译出蛋白质。 个体生物学水平鉴定---抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定。 ①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代 ②使目的基因能够表达和发挥作用 主要指编码蛋白质的结构基因。 基因文库获取：(定义、分类、构建方法、怎样获取？) 人工合成：（反转录、化学合成） PCR：（聚合酶链式反应）（变性、复性、延伸） 启动子+目的基因+终止子+标记基因 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 转化: 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程 检测 鉴定： 利用标记基因筛选 限制酶、DNA连接