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第二章 核酸化学 核酸的研究历史 核酸的发现: 1868年,瑞士的内科医生F. Miescher从脓细胞核中提取到一种富含磷元素的酸性化合物,将其称为核素(nuclein); 后来他又从鲑鱼精子中分离出类似的物质,并指出它是由一种碱性蛋白质与一种酸性物质组成的,此酸性物质即是现在所知的核酸(nucleic acid)。 1889年Altman制备了不含蛋白质的核酸制品,命名为核酸.以后四五十年中,Kossel和Levene等在确定核酸组分方面做了大量的工作,逐步明确核酸可分为两大类:脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA). 1944年Avery等人对肺炎球菌的转化实验彻底纠正了蛋白质携带遗传信息这一错误认识,确立了核酸是遗传物质的重要地位; 1952年,Alfred Hershey和Martha Chase用放射性同位素P标记噬菌体进一步肯定了DNA遗传作用。 1953年,Watson和Crick创立的DNA双螺旋结构模型,不仅阐明了DNA分子的结构特征,而且提出了DNA作为执行生物遗传功能的分子,从亲代到子代的DNA复制(replication)过程中,遗传信息的传递方式及高度保真性,为遗传学进入分子水平奠定了基础,成为现代分子生物学发展史上最为辉煌的里程碑。 核酸与蛋白质一样,是一切生物机体不可缺少的组成部分。 核酸是生命遗传信息的携带者和传递者,它不仅对于生命的延续、生物物种遗传特性的保持、生长发育、细胞分化等起着重要的作用,而且与生物变异,如肿瘤、遗传病、代谢病等也密切相关。 因此,核酸是现代生物化学、分子生物学和医学的重要基础之一。 核酸是存在于细胞中的一类大分子酸性物质,包括核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两大类。 RNA和DNA都是以单核苷酸为基本单位所组成的多核苷酸长链。 RNA主要参与遗传信息的表达,而DNA则是遗传信息的载体。 核酸分为两大类. 脱氧核糖核酸(DNA)Deoxyribonucleic Acid 核糖核酸(RNA)Ribonucleic Acid。 1、脱氧核糖核酸(DNA) DNA分子含有生物物种的所有遗传信息,分子量一般都很大。 DNA为双链分子,其中大多数是链状结构大分子,也有少部分呈环状结构。 DNA主要分布于细胞核中;线粒体和叶绿体中也有DNA。 2、核糖核酸(RNA) RNA主要分布于细胞质和细胞核中。 RNA为单链分子。 RNA主要是负责DNA遗传信息的翻译和表达,分子量要比DNA小得多。但RNA在细胞中的含量比DNA高。 RNA的类别 原核和真核细胞中都含有三种主要RNA: mRNA(信使RNA) tRNA(转运RNA) rRNA(核糖体RNA) 真核细胞中还含有其它的RNA: hnRNA(核不均RNA)——mRNA的前体物 SnRNA(核小RNA)——参与RNA的加工 1)mRNA (信使RNA) 约占总RNA的5%。 不同细胞的mRNA的链长和分子量差异很大。 它的功能是将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地 – 核糖核蛋白体。 二、核酸的分布 三、核酸的生物学功能 除少数病毒(RNA病毒)以RNA作为遗传物质外,多数有机体的遗传物质是DNA。 不同有机体遗传物质(信息分子)的结构差别,使得其所含蛋白质(表现分子)的种类和数量有所差别,有机体表现出不同的形态结构和代谢类型。 RNA的主要作用是: 1)从DNA转录遗传信息,并指导蛋白质的合成。 2)作用于RNA转录后的加工与修饰 3)基因表达与细胞功能的调节 4)生物催化与其它细胞持家功能 5)遗传信息的加工与进化 一、核酸的元素组成 基本元素:C H O N P 核酸的元素组成有两个特点: 1. 一般不含S 2. P含量较多,并且恒定(9%-11%)。 因此,实验室中用定磷法进行核酸的定量分析。(DNA9.9% 、RNA9.5%) 二 、核酸的分子组成 核酸(DNA和RNA)是一种线性多聚核苷酸,它的基本结构单元是核苷酸。 核苷酸本身由核苷和磷酸组成, 而核苷则由戊糖和碱基形成 DNA与RNA结构相似,但在组成成份上略有不同。 组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为β-D-2-脱氧核糖;RNA所含的糖则为β-D-核糖。 D-核糖与D-脱氧核糖的区分 D-核糖 与浓HCl和甲基间苯二酚混合后,加热呈绿色; 原理:核糖与酸作用生成糠醛,糠醛与甲基间苯二酚和FeCl3呈绿色。 D-2脱氧核糖 与二苯胺作用呈蓝色反应; 原理:它与酸生成ω-羟基-γ-酮戊醛,后者再与二苯胺作用呈蓝色 3)修饰碱基(稀有碱基) 多数为主要碱基的修饰产物或代谢产物,在体内含量甚少的
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