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- 2016-12-16 发布于湖北
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目的基因插入Ti质粒的T-DNA上 农杆菌 导入植物细胞 整合到受体细胞的染色体上 目的基因的遗传特性得以维持稳定和表达 1.农杆菌特点:易感染双子叶植物和裸子植物。Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞的染色体上 2.转化 * * * * * 如果显示出杂交带,就表明待测样品含有目的基因或目的基因已经转录。 * * * 细胞类型 常用方法 受体细胞 转化过程 植物细胞 农杆菌转化法 体细胞 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA 动物细胞 显微注射技术 受精卵 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成为具有新性状的动物 微生物细胞 Ca2+处理法 原核细胞 用Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 将目的基因导入受体的方法 * * * 目的基因的检测与鉴定 检测步骤 目的 方法 原理 工具 现象 1 DNA分子杂交技术 碱基互补配对 放射性同位素作标记的含目的基因的DNA片段 杂交带 2 检测目的基因是否转录出了mRNA DNA分子杂交技术 碱基互补配对 放射性同位素作标记的含目的基因的DNA片段 杂交带 3 检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗原-抗体杂交 抗体的专一性 特定抗体 杂交带(阳性反应
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