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FLK-1+胎肝细胞移植治疗急性肝损伤**★
李 娜1,丁伟荣2,伍柏青3,刘婷婷2,程洪波2,金成豪2 (1南昌大学医学院,江西省南昌市 330006;江西省人民医院,2血液科, 3检验科,江西省南昌市 330006)
文章亮点:
文章的特点为表明了胎肝FLK-1+细胞具有分化肝细胞的潜能,未经诱导的FLK-1+细胞不表达白蛋白,而经肝细胞生长因子诱导后高表达白蛋白,并证明FLK-1+细胞的Oct-3/4和Rex-1表达随着干细胞分化明显下降或消失,提示分化后FLK-1+细胞失去干细胞特性。
关键词:
器官移植;细胞移植;肝功能损伤;FLK-1+细胞;细胞移植;肝细胞生长因子;表皮生长因子;谷草转氨酶;谷丙转氨酶;国家自然科学基金
主题词:
肝细胞生长因子;表皮生长因子;天冬氨酸氨基转移酶类;丙氨酸转氨酶
基金资助:
国家自然科学基金项目*;江西省自然科学基金项目(2008GZY0084)资助*
摘要
背景:作者先期研究表明,在鼠胚第17-19天胎肝存在一类FLK-1+细胞,表达胚胎干细胞的特征性标志,并具有多向分化功能。
目的:验证胎肝FLK-1+细胞治疗小鼠急性肝损伤的修复作用。
方法:免疫磁珠提取及流式细胞仪检测胎肝FLK-1+细胞;RT-PCR检测FLK-1+细胞Oct-3/4、Rex-1基因;肝细胞生长因子和表皮生长因子诱导FLK-1+细胞向肝细胞分化。腹腔注射四氯化碳建立小鼠急性肝损伤模型并随机分为2组:对照组模型小鼠仅输入生理盐水,实验组模型小鼠尾静脉输注诱导分化FLK-1+细胞(1×106细胞),16 h后两组取血测定肝功能,观察64 h小鼠死亡率。
结果与结论:胎鼠肝脏FLK-1+细胞高表达Oct-3/4、Rex-1,白蛋白表达的FLK-1+细胞阳性率为0.6%。经肝细胞生长因子诱导3 d后FLK-1不表达,Oct-3/4和Rex-1表达显著下降或消失。经肝细胞生长因子和表皮生长因子诱导后96.38%的FLK-1+细胞表达白蛋白。诱导3d的FLK-1+细胞移植后16 h小鼠血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶显著低于对照组(P 0.05),血清白蛋白显著高于对照组(P 0.05);两组血清总胆红素和纤维蛋白原差异无显著性意义(P 0.05);移植组64 h死亡率为61.5%与对照组(80%)差异无显著性意义(P 0.05)。说明胎鼠肝脏肝细胞生长因子和表皮生长因子诱导3 d的FLK-1+细胞移植可较好地改善急性肝损伤的肝细胞功能。
Transplantation of fetal liver FLK-1+ cells in treatment of acute liver injury
Li Na1, Ding Wei-rong2, Wu Bo-qing3, Liu Ting-ting2, Cheng Hong-bo2, Jin Cheng-hao2 (1Medical College of Nanchang University, Nanchang 330006, Jiangxi Province, China; 2Department of Hematology, 3Department of Clinical Laboratories, Jiangxi Provincial People’s Hospital, Nanchang 330006, Jiangxi Province, China)
Abstract
BACKGROUND: Previous studies of our research group have shown that FLK-1+ cells existed in the mouse fetal liver at embryonic 17-19 days, and they expressed embryonic stem cells and presented multi-differentiation potentials.
OBJECTIVE: To evaluate the therapeutic effect of the transplantation of FLK-1+ cells derived from mouse fetal liver on acute liver injury in mice.
METHODS: The FLK-1+ fraction were enriched from the fetal liver with immunomagnetic beads method and detected by flow cytometry. The Oct-3/4 and R
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