液质联用技术的临床检验应用进展101113幻灯片.ppt

未来展望 样品前处理、检测通量和配套试剂的创新 蛋白和多肽定量 高分辨质谱 1、著名的英国物理学家，证明了电子的存在，测定了电子的荷质比，轰动了整个物理学界。1905年，他被任命为英国皇家学院的教授；1906年荣获诺贝尔物理学奖；1916年任皇家学会主席;1919年被选为科学院外籍委员会首脑。 2、借助自己发明的质谱仪发现了大量非放射性元素的同位素，以及阐明了整数法则”，并且，通过质谱分析，他解释了造成实际值与上述法则偏差的原因是同位素的存在，他被授予1922年诺贝尔化学奖。 3、德国物理学家，离子阱的开发人之一，1953年发明了四极质谱仪，又称保罗质谱仪，用于质谱测量。1989年获诺贝尔物理学奖。 4、约翰·贝内特·芬恩博士（Dr. John Bennett Fenn，1917年6月15日－ ），美国化学家。由于对生物大分子的鉴定和结构分析方法的研究，与田中耕一、库尔特·维特里希共同获得了2002年诺贝尔化学奖。约翰·芬恩对成团的生物大分子施加强电场，田中耕一则用激光轰击成团的生物大分子。这两种方法都成功地使生物大分子相互完整地分离，同时也被电离。它们的发明奠定了科学家对生物大分子进行进一步分析的基础。现任职于京都市岛津制作所，为该公司研发工程师， LC/MS分析过程中，样品首先经LC分离，随后样品被质谱仪检测。质谱仪的分析过程是：样品中的被测组分在离子源内电离并形成带电离子（离子化），带电离子通过由电场的质量分析器（四极杆），根据m／z的不同将这些带电离子分离，最后到达检测器被检测，通过数据管理软件进行处理分析给出分析结果。 * 液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）属于色谱分析方法，是近年来迅速发展的定量分析技术，功能强大且应用广泛； 液相色谱具有良好的分离性能，应用广，检测能力弱；必须要基线分离，价格相对比较便宜。 质谱仪具有高特异、高灵敏、高通量的检测能力；无须实现基线分离，价格比较贵。 二者的结合可对复杂的生物样品中微量的小分子化合物进行灵敏可靠的分子水平的定量分析。 LC只是收音机，只闻其声，不见其人是。LC-MS/MS是彩色电视机，声画同步，提供更多的信息。 华西，协和。 上海：瑞金、中山、华山、新华医院。徐汇区中心医院属于在临床检验中应用起步比较早的单位。 第三方的检验机构：金域（8000个VD/月）、洛奇、上海医药临床研究中心、健拓，Covence等 由于质谱方法在测量的准确性和可靠性上所具有的巨大优势，目前很多国际组织或校准品制造商都用质谱法作为参考方法，对一些测定项目的校准品进行定值，如：葡萄糖、尿酸、T4、肌酐等。 * * 1997年，美国医学协会杂志：发表了一篇有关各种危险因素和高同型半胱氨酸之间协同作用的文献，我们可以看出，包括高血压、胆固醇、吸烟在内的任何危险因素均与HCY具有协同作用，其中高血压与HCY的协同作用尤为突出，伴有高HCY 的高血压导致心脑血管事件的危险性是单纯高血压的4-5倍，是正常人的28倍！而这类人群就是H型高血压。正是基于Hcy与血压之间的这种高度协同作用，才有了H型高血压这个疾病概念的提出。  同型半胱氨酸是一种含硫氨基酸代谢的中介，它连接蛋氨酸循环（左）与叶酸循环（右）。通过众多腺苷依赖甲基转移反应（酶之一，guanidinoacetate甲基，催化肌酸的形成，因此，肌酐），同型半胱氨酸形成蛋氨酸（Met）。同型半胱氨酸的代谢取决于多种B族维生素，包括叶酸，B12（钴胺素??），维生素B6（吡哆醇），B2（核黄素）。同型半胱氨酸的形成和清除之间的不平衡会导致血浆中同型半胱氨酸浓度的变化。同型半胱氨酸是国际公认的心脑血管疾病的独立风险因子。 测定结果准确性和重复性的差可导致明显不同的结果，误导临床诊断。质谱法测定结果为32 umol/L，循环酶法测定结果可达21.8-45.0 25(OH)D是1,25-(OH)2D的前体的活性形式；25(OH)D是25(OH)D2和D3的总和； 25(OH)D的半衰期较长(15d)，1,25-(OH)2D为15h； 在脂肪组织中储存，是体内VD主要的储存和转运形式；临床检测25(OH)D可用来评估患者体内维生素 D 的状况； The level of 25OHD less than 20 ng/mL is defined as Vitamin D deficiency, 21-29 ng/mL as insufficiency and 30-60 ng/mL as sufficiency by most experts. * 据统计，全球2012年的VD测试量超过1.3亿个，检测市场达数百亿美金。我国据估计至少有3500万以上的测试量，市场需求数十亿人民币 美国Mayo Clinic从2006年1.9万/月测试，到2008年底