选修1 生物技术实践幻灯片.ppt

2．分离DNA、PCR技术、分离蛋白质三者比较 分离DNA 分离蛋白质 实验原理 DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 实验过程 选取材料→破碎细胞释放DNA→除杂→DNA析出与鉴定 样品处理→凝胶色谱操作 实验结果 获得较纯净的DNA 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 实验意义 为DNA研究打下基础 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 [例1]　下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是 (　　) A．前者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好 B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色 C．在DNA粗提取实验中，往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物为止 D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等 [解析]　鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难度。DNA初次析出时，加清水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于血红蛋白的分离和纯化。 [答案]　A 1.细胞内DNA复制与PCR技术的比较 细胞内DNA复制 PCR 不 同 点 解旋 在解旋酶作用下，边解旋边复制 以上高温解旋，双链完全分开 酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶 引物 RNA DNA或RNA 温度 体内温和条件 高温 相 同 点 ①需提供DNA复制的模板 ②四种脱氧核苷酸为原料； ③子链延伸的方向都是从5′端到3′端； 2．PCR的过程 (1)变性：90℃以上时，双链DNA解旋为单链。 (2)复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对方式与两条单链DNA结合。 (3)延伸：温度上升到72℃左右，溶液中四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 [例2]　(2013·徐州模拟)PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是(　　) A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高 [解析]　PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和四种脱氧核苷酸。 [答案]　C 易误点 不能正确区分植物芳香油提取的方法 失误类型 知识理解类失误 提取方法 水蒸气蒸馏法 压榨法 有机溶剂萃取法 实验原理 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携 带出来 通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油 使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂获得芳香油 方法步骤 ①水蒸气蒸馏 ②分离油层 ③除水过滤 ①石灰水浸泡、漂洗 ②压榨、过滤、静置 ③再次过滤 ①粉碎、干燥 ②萃取、过滤 ③浓缩 提取方法 水蒸气蒸馏法 压榨法 有机溶剂萃取法 适用范围 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取 适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中 优点 简单易行，便于分离 生产成本低，易保持原料原有的结构和功能 出油率高，易分离 局限性 水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题 分离较为困难，出油率相对较低 使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量 高考命题常从以下角度设置陷阱 (1)原料、试剂角度：考查不同芳香油提取的原料、试剂 和方法。 (2)操作流程：考查芳香油提取的操作过程及注意事项。 [例3]　(2011·海南高考)许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答问题： (1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用________(鲜、干)薄荷叶作原料，其原因______________。 (2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是________，原理是_________________________________________ _______________________________。 (3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是______________