3.细胞工程(shi)课件.pptVIP

3.1 细胞工程的基础知识与基本技术 3.2 植物细胞工程 细胞分裂素类激素 继代增殖阶段 手指玫瑰 3.2.2 植物细胞培养和次生代谢物生产 立柱培养系统操作要素 3.2.3 植物原生质体制备与融合 几个名词： 细胞工程3.2.3 植物原生质体制备与融合 原生质体分离 野生马铃薯和栽培马铃薯细胞融合 设想中的“番茄-马铃薯” 3.2.4 单倍体植物的诱发与利用 单倍体植株的培育 单倍体植物的加倍 3.2.5 人工种子的研制 人工种子的优点 细胞工程 人工种子的制备 3.2.6 植物脱病毒技术 物理方法：温度（高温） 化学方法：孔雀绿等（难） 生物学方法：芽尖、根尖 综合脱毒方法 生物学方法 茎尖培养 茎尖越小越没病毒，但越小越难成活,一般要超过2万个细胞，或至少3~10 mg茎尖。 花瓣培养 花药培养 植物脱毒处理 种子脱毒 植物脱病毒进展 3.3 动物细胞工程 细胞系（cell line)  原代培养物经首次传代成功后的细胞培养物，包括有限细胞系和连续细胞系。 细胞株（cell strain)  通过选择或克隆从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的培养物。 3.3.1动物细胞组织培养 动物细胞培养器 无血清培养 细胞和组织的体外培养一般都需添加一定量的血清，不仅价格昂贵、容易混进污染物(包括病毒和病菌)，而且其成分不能完全确定，不同批次的血清之间难以保证实验结果的可重复性。因此无血清培养日益受到重视，并已取得了较大的进展。 培养物的长期保存 目前最常用的是液氮保存法： 将成熟培养物(细胞)与5%～10%的甘油或二甲亚砜混匀，封装于若干个安瓿瓶中； 缓慢降温(1～3℃/min)至-30℃； 继续降温(15～30℃/min)至-150℃； 转移至液氮冻存，可无限期保存。 细胞工程 细胞组织培养污染的防治 3.3.2 动物细胞融合 病毒诱导融合 杂种细胞筛选 3.3.3 淋巴细胞杂交瘤产生单克隆抗体 淋巴细胞杂交瘤产生单克隆抗体技术示意图 3.3.4 细胞核移植与动物克隆 维尔穆特等用羊乳腺细胞克隆了多莉（1996） “多莉（Dolly）”的身世 克隆哺乳动物基本途径 哺乳动物克隆存在的问题 3.3.5 染色体转移 微细胞制备 微细胞与受体细胞融合 3.3.6 人类干细胞研究 干细胞（stem cell）简介 干细胞的特征 干细胞的应用 1999年干细胞研究被世界著名杂志Science评为十大科技进展之首；2000年再度入选世界十大科技进展 国家干细胞基地通过验收 干细胞分类 干细胞分类示意图 干细胞研究“三步曲” 获得干细胞系 干细胞培养 建立干细胞诱导分化模型 效果考察 干细胞治疗的优点 胚胎干细胞 胚泡中的胚胎干细胞 桑椹胚(囊胚) 人早期胚胎——囊胚 胚胎干细胞的特征 胚胎干细胞的培养 鼠胚胎干细胞培育出胰岛细胞 胚胎干细胞生成牛微型肾 中国建立人胚胎干细胞 造血干细胞 三类造血干细胞 造血干细胞的分化 造血干细胞表面标志物 骨髓库 造血干细胞培育出人体肾脏组织 造血干细胞移植供者来源难题破解 外周血干细胞移植 外周血干细胞移植治疗下肢缺血性疾病 脐血干细胞 脐血干细胞是更原始的干细胞 用脐带血细胞培育出肝细胞 脐带血干细胞修复脊髓 脐血库 脐血库建造“生命银行” 脐带血储备 干细胞培育出胸腺 干细胞长成牙冠 神经干细胞治脑瘫 干细胞形成脑组织 单个干细胞使小鼠生成乳腺 干细胞治尿失禁 干细胞首次培育出内脏细胞 首次成功移植人造再生膀胱 干细胞培育出心脏瓣膜 羊水干细胞培育出人体组织 干细胞器官工程的难点 3.4 微生物细胞工程 3.4.1原核细胞的原生质体融合 溶菌酶的作用 革兰氏阳性菌融合的主要步骤 革兰氏阴性菌球状体制备 融合子筛选 降解酵母细胞壁的酶 丝状真菌的脱壁酶 融合子分析 胞质标记分析 生化分析 应用非选择标记 复习思考题 如何从一片嫩叶经组织培养培育出众多的完整植株? 如何从植物细胞培养中获得较高的次生代谢物产量? 单倍体植株形单体弱, 为什么还有不少科学家热衷于诱发产生单倍体植株? 什么叫植物原生质体?如何进行植物原生质体的融合? 可以采取哪些途径脱去植物体内的病毒？如何检测植株中是否还有病毒？ 人工种子包括哪几部分?如何制备人工种子?