平面色谱技术03课件.pptVIP

b.二元展开剂的极性和强度的选择 二元展开剂由一种强度较大的溶剂（极性调节剂）和一种强度近于零的溶剂（底剂）按一定比例混合而成。 乙醚-正己烷（50：50） P′=Φ乙醚P乙醚 + Φ正己烷P正己烷 =0.5×2.8 + 0.5×0 =1.4 在乙醚-正己烷（50：50）中，分别用氯仿、二氯甲烷替代乙醚，其体积比为： Φ氯仿=0.5×2.8/4.1=0.34 Φ二氯甲烷=0.5×2.8/3.1=0.45 氯仿：正己烷（34：66） 二氯甲烷：正己烷（45：55） 为了使选择性的差别达到最大，应该从靠近三角形顶部的组中选择强度较强的溶剂。 c.二元展开剂的选择性 二元展开剂选择性的改变，主要是通过其中强度较强溶剂的组别的替换来实现的。 d.其它因素 a)拖尾抑制剂 b)降低粘度和促溶作用 氯仿-甲醇-水、正丁醇-冰醋酸-水 吸附层析法中的几条规则： ε°增大则R?值增大，但选择性变小； ε°减小则R?值减小，但选择性增大。 二元展开剂中，当强度较强的溶剂所占体积最大或最小时选择性最大。 当展开剂的组成改变时，如果能引起溶剂分子和溶质分子间的氢键作用的改变，则会产生最大的选择性。 如果用无水展开剂时组分斑点拖尾，则可选用去活性的吸附剂。 4）定位和定性 （1）光谱检出法 紫外 0.5μg 荧光 0.01ng （2）蒸气检出法 （3）试剂显色法 ①显色方法 a.喷雾显色　　b.浸渍显色　　c.超压衍生化 　　d.展层-显色法 ②显色试剂 　　 a.通用显色剂 a)硫酸 组成：硫酸-水（1:1），硫酸-甲醇或乙醇（1:1），1.5M硫酸与0.5~1.5M硫酸铵。 方法：喷后110℃烤15min,不同有机物显不同颜 色。 b)0.5%碘的氯仿溶液 c)中性0.05%高锰酸钾溶液 易还原化合物在淡红背景下显黄斑。 d)5%磷钼酸乙醇溶液 方法：喷后120℃烘烤，还原化合物显蓝斑，再用氨气熏，则背景变无色。　 b.专属显色剂 （4）定性 ①斑点的R?值 　②斑点的显色特性 ③斑点的原位光谱扫描 　　a.薄层色谱-紫外可见光谱扫描 　　b.薄曾色谱-三维光谱扫描 　④与其它分析技术的联用 a.与其它色谱法：GC、HPLC 　　b.与电化学法联用：阳极伏安法、脉冲极谱法、库仑滴定法 　　c.与光谱法联用：原子吸收、拉曼光谱、IR、MS 、NMR （５）定量　 　平板色谱简单、方便、及操作费用低， 可以在一块层析板上同时展开多个试样及将多条滤纸同时展开。 采用方形薄层板还可以方便的进行二维展开，即按一般方法展开后，改变方向和展开剂再次展开，进一步改善分离效果。 试样一般不需要经过预处理即可分离。 ３.平板色谱特点及应用 缺点： 分离效率较低，不适用挥发性试样分离。定性定量不便。 应用：平板色谱法在染料、农药、医药、有机酸碱类化合物、糖类化合物、氨基酸、蛋白质及中草药中有效成分的分离分析中经常被使用。也可以用于无机离子的分离。还经常作为液相色谱的一种预试方法。 合成药物的分析方面的应用 药物的定性检鉴别 纯度检查 合成药制剂的含量测定 稳定性考查 药物代谢研究 合成工艺的监控及反应机制的研究 谢谢！ 各组分在薄板上的位置常用比移值（Rf）来表示。 A，B为样品溶液点样的位置，如图1所示： 1、比移值（Rf） 起始线 a b c A B 溶剂 前沿 图1、Rf值的测量示意图 A物质的Rf = ; B物质的Rf = ; 所以Rf值与K之间关系可用下式表示： Rf =1/[1+K（Vs/Vm）] 原点至溶剂前沿的距离 原点至斑点中心的距离 = Rf a b b c  在一定色谱条件下， Rf值为常数，其值在0~1之间，若某组分Rf =0，表示它不随展开剂移动，吸附剂对它的吸附力很强，留在原点不动。若Rf =1，表示吸附剂对它基本不吸附，随着展开剂到达溶剂前沿，K=0。 Rf值越小，表示该组分K越大，极性越大。根据物质的化学结构不同，极性不同，在同一薄板上展开，我们能预测它们的Rf值大小 。 5.平板色谱一般分离过程 将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为展开剂）中，随着溶剂向上的移动，经过试样点时，带动试样向上运动。 纸层析和薄层层析流动相的移动是依靠毛细作用。 比移值（R?)：溶质移动距离与流动相移动距离之比 1）