戊巴比妥钠氨基甲酸乙脂hc氯醛课件.pptVIP

戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂，α–氯醛糖，氯胺酮对血管的作用及机制 第二组 徐娜妮 张欢 蔡军 目的 了解戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂，α–氯醛糖，氯胺酮对血管平滑肌的舒张作用及机制。 研究现状 血管内皮生成的血管活性物质 多年来一直以为血管内皮只是衬在心脏和血管腔面的一层单层细胞组织；在毛细血管处，通过内皮进行血管内外的物质交换。近年已证实，内皮细胞可以生成并释放若干种血管活性物质，引起血管平滑肌舒张或收缩 。 原理 血管内皮生成的舒血管物质 内皮细胞内的前列环素合成酶可以合成前列环素 内皮生成的另一类舒血管物质更重要，即内皮舒张因子 内皮细胞表面存在着一些受体，例如P物质受体、5-羟色胺受体、ATP受体、M型胆碱能受体等 ，这些受体被相应的物质激活后，可释放EDRF。 原理 血管内皮生成的缩血管物质 （内皮缩血因子 ） 内皮素（endothelin）是已知的最强烈的缩血管物质之一 材料 健康的SD大鼠，雄性，体重250～280克； 麦氏浴槽，超级恒温水浴，温度计，5g张力换能器，微机生物信号采集处理仪，手术剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，100?l、1m1移液器，棉线； 试剂：2％戊巴比妥钠，20％氨基甲酸乙脂，2％ α–氯醛糖，2％氯胺酮，Krebs液 ，3mo1/L氯化钾 95%O2+5%CO2混合气体 方法 用保留血管内皮和去血管内皮的离体兔胸主动脉做标本，记录用药前后血管张力的变化。 方法 （2）需要保存内皮的血管，动作应轻柔。如需无内皮的血管环，可用棉签或牙签将血管内皮轻轻檫去。 （3）将固定杆上的不锈钢钩轻轻穿入血管环，并将另一连有细线的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿入，将其固定悬挂于盛有5ml Krebs液的麦氏浴槽内（图11-27-1），通入混合气体，调节通气量至一个一个小气泡逸出为好。浴槽内温度应保持37?0.5℃。 方法 （4）血管环的初始张力前15分钟为1g，15分钟后调至2g，并以此张力平衡45分钟。每隔15分钟换液一次。 （5）用终浓度60mmol KCL（3mol KCL 100?l）收缩血管环，待收缩稳定后用预热的Krebs洗脱，反复冲洗直至张力恢复到初始值为止；重复加入同一浓度KCL，连续3次，用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值。 方法 （6）用10-4mol的苯肾上腺素50?l（终浓度10-6mol）诱发血管收缩达稳定后，加入10-4mol的乙酰胆碱50?l（终浓度10-6M），观察血管的松弛效应是否超过10%，如果≥10%则为内皮完整，否则为内皮受损或无内皮。 方法 图11-27-1 血管灌流示意图 用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值， 间隔30分钟进行下一项目，每隔15分钟换一次。 观察项目 内皮完整 按以下顺序把药物加于浴槽中（每次给药在收缩达高峰后记录动脉环张力变化，然后用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值） 加入2％戊巴比妥钠200?L； 加入20％氨基甲酸乙脂200 ?L； 加入2％ α–氯醛糖200 ?L； 加入2％氯胺酮200 ?L； 把主动脉环取出，用滤纸吸去其表面水分，称重。 观察项目 内皮缺损 重复完整内皮时给药操作并记录数据 分析实验结果 讨论 （1）Krebs必须临用时用新鲜蒸馏水配制。 （2）为什么有些药物内皮完整内皮损伤的血管 松弛效应不同，有些无影响？ （3）讨论分析影响实验结果的主要干扰因素及 改进方法 * * 原理 血管平滑肌细胞有α和β两类肾上腺素能受体。去甲肾上腺素与α肾上腺素能受体结合，可导致血管平滑肌收缩；与β肾上腺素能受体结合，则导致血管平滑肌舒张。 方法 1.PcLab参数设置： 记录方式：连续记录； 存盘方式：连续存盘； 采样速率：5ms； 输入：DC耦合； 放大倍数200～500。 方法 2．标本制备 （1）击昏大鼠，剪开胸腔，迅速取出心脏及胸主动脉放入盛有4℃的混合气体饱和的Krebs营养液的培养皿中，连续用混合气体充气。分离出主动脉，将血管内的残存血液冲洗干净，小心剥去外围的结缔组织，将主动脉弓以下的胸主动脉剪成4mm长的动脉环数段备用。 表1：各药物对血管收缩张力大小影响 实验结果 `x±s 6 5 4 3 2 1 内皮 缺损 内皮完整 内皮 缺损 内皮 完整 内皮 缺损 内皮 完整 内皮 缺损 内皮完整 2％氯胺酮 2％α–氯醛糖 20％氨基甲酸乙脂 2％戊巴比妥钠 组别 注： *p＜0.05 **p＜0.01 内皮缺损VS内皮完整