细胞生物学第11章课件.ppt

第十一章 核糖体 核糖体是细胞最基本的不可缺少的结构 其唯一功能是按照mRNA的指令由氨基酸合成多肽链 第一节 核糖体的类型与结构 附着核糖体/游离核糖体 70S核糖体/80S核糖体 大亚基/小亚基 1.1 核糖体的基本类型与成分 基本成分 r蛋白质：40%，核糖体表面 rRNA：60%，核糖体内部 核糖体大小亚单位在细胞内常常游离于细胞质基质中，只有当小亚单位与mRNA结合后，大小亚单位才与小亚单位结合形成完整的核糖体。由大亚基和小亚基按照1：1比例结合而成。 1.1.1 70S核糖体 分布 原核细胞的核糖体为70S核糖体 线粒体和叶绿体中的核糖体也近似于70S。 50S大亚基 23SrRNA、5SrRNA 31种蛋白质； 30S小亚基 16 SrRNA 21种蛋白质； 1.1.2 80S核糖体 分布：真核细胞的核糖体为80S核糖体。 60S大亚基 28SrRNA、5SrRNA、5.8SrRNA 49种蛋白质； 40S小亚基 18 SrRNA 33种蛋白质； 体外实验 当Mg2＋浓度降低时，80S核糖体解离为大、小亚基； 当Mg2＋浓度增高时，则常常形成120S的二聚体。 1.1.3 游离核糖体和附着核糖体 在真核细胞中很多核糖体附着在内质网的膜表面，称为附着核糖体 糙面内质网； 核外膜表面； 原核细胞的质膜内侧。 一些核糖体不附着在膜上，呈游离状态，分布在细胞质基质内，称游离核糖体。 附着核糖体与游离核糖体所合成的蛋白质种类不同，但核糖体的结构与化学组成是完全相同的。 1.2 核糖体的结构 是同一生物中不同种类的r蛋白的一级结构均不相同，在免疫学上几乎没有同源性。 不同生物同一种类r蛋白之间具有很高的同源性， 并在进化上非常保守。 核糖体的重装配不需要其它大分子的参与，是一个自我装配的过程。 装配过程表现出先后次序性。 1.2.1 核糖体结构与功能的分析 ?离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白； ?纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装， 显示核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系 ?双向电泳技术可显示出E.coli核糖体在装配各阶段中， 与rRNA结合的蛋白质的类型 ?双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋白在 结构上的相互关系 ?电镜负染色与免疫标记技术结合，研究r蛋白在核糖 体的亚单位上的定位。 对rRNA，特别是对16S rRNA结构的研究 16SrRNA的二级结构具有更高的保守性：臂环结构(stem-loop structure) rRNA臂环结构的三级结构模型 70S核糖体的小亚单位中rRNA与全部的r蛋白关系的空间模型 16SrRNA的一级结构是非常保守的 1.2.2 蛋白质合成过程中很多重要步骤与50S核糖体大亚单位相关 依赖延伸因子Tu（EF－Tu）的氨酰tRNA的结合； 延伸因子G（EF－G）介导的转位作用； 依赖于起始因子2的fMet－tRNA的结合； 依赖于释放因子的蛋白合成终止作用； 应急因子与核糖体结合产生ppGpp（p）阻断蛋白合成等。 上述过程中的多数因子为G蛋白，具有GTPase活性，故将核糖体上与之相关位点称为GTPase相关位点。 1.3 核糖体蛋白质与rRNA的功能 核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点 与mRNA的结合位点； 氨酰基位点（A位） ——与新掺入氨酰tRNA的结合位点 肽酰基位点（P位） ——与延伸中的肽酰tRNA的结合位点 E位点——肽酰转移后与即将释放的tRNA的结合位点 与肽酰tRNA从A位点转移到P位点有关的转移酶（即延伸因子EF－G）的结合位点； 肽酰转移酶的催化位点。 与tRNA结合的P位点、A位点或E位点各自都涉及一套rRNA上不同的区域。 在核糖体中rRNA是起主要作用的结构成分 具有肽酰转移酶的活性； 为tRNA提供结合位点（A位点、P位点、E位点）； 为多种蛋白质合成因子提供结合位点； 在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结合以及在肽链的延伸中与mRNA结合。 核糖体大小亚单位的结合、校正阅读、无意义链或框架漂移的校正、以及抗生素的作用等。 r蛋白在翻译过程中也起着重要的作用； 对rRNA折叠成有功能的三维结构是十分重要的； 在蛋白质合成中，核糖体的空间构象发生一系列的变化，某些r蛋白可能对核糖体的构象起“微调”作用； 在核糖体的结合位点上甚至可能在催化作用中，r蛋白与rRNA共同行使功能。 第二节  多聚核糖体 与蛋白质的合成 2.1 多聚核糖体 由mRNA分子将许多核糖体串联而成的结构 每种多聚核糖体的数目取决于mRNA的长度 无论是附着核糖体还是游离核糖体，都常常以多聚核糖体形式存在 多聚核糖