脂肪的测定方法.ppt

称量 将水浴蒸干的脂肪瓶于95~105℃烘箱中干燥2h，取出放干燥器内冷却0.5h后，精密称重。 计算 脂肪（%）= 索氏提取操作方法 溶剂提取法（索氏提取法） 使用的乙醚要求无水、无醇、无过氧化物 脂肪瓶中有机溶剂不宜装得过满，以2/3体积为宜。 抽提时水浴温度不可过高，以每分钟80滴左右的速度（每小时回流12～16次） 乙醚（或石油醚）为易燃品，蒸馏时严禁用电炉或直接以火焰加热。 脂肪的测定方法 原理 仪器试剂 适用范围 注意事项 操作方法 酸水解法 将试祥与盐酸溶液一同加热进行水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量，提取物的重量即为脂肪含量。 酸水解法测得的是游离脂肪与结合脂肪的总量 脂肪的测定方法 原理 仪器试剂 适用范围 说明 操作方法 酸水解法 适用于各类食品总脂肪的测定，特别对于易吸潮，结块，难以干燥的食品应用本法测定效果较好，但此法不宜用高糖类食品，因糖类食品遇强酸易炭化而影响测定效果。 应用此法，脂类中的磷脂，在水解条件下将几乎完全分解为脂肪酸及碱，当用于测定含大量磷脂的食品时，测定值将偏低。故对于含较多磷脂的蛋及其制品，鱼类及其制品，不适宜用此法。 脂肪的测定方法 原理 仪器试剂 适用范围 说明 操作方法 酸水解法 试剂：乙醇（95%体积分数） 乙醚（不含过氧化物） 石油醚 盐酸 仪器：100ml带塞量筒 恒温水浴锅 脂肪的测定方法 原理 仪器试剂 适用范围 说明 操作方法 酸水解法 样品处理 →水解 → 提取 →称重→计算 脂肪的测定方法 原理 仪器试剂 适用范围 说明 操作方法 1．样品处理 固体样品：精密称取样品2 g，置于50 mL大试管内，加水8 mL，混匀后再加盐酸10ml。 液体样品：称取10.0 g，置于50 mL大试管内，加10ml盐酸。 将试管放入70℃～80℃水浴中，每隔5～10 min用玻棒搅拌一次，至全部样品消化完全为止，约40 min～50min。 酸水解操作方法 2.测定程序 取出试管，加入10 mL乙醇，混合。冷却后移于100 mL带塞量筒中，以乙醚25 mL分数次洗试管，洗液并入量筒中；加塞，振摇1 min，小心开塞放出气体，再塞好，静置12 min； 小心开塞，用石油醚—乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10 min～20 min，待上部液体清晰，记录醚层体积 吸出上清液于已恒重的锥形瓶内，再加5 mL乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干，置100℃±5℃烘箱中干燥2 h，取出放干燥器内冷却0.5 h后称重。 酸水解操作方法 计算： 式中： —接收瓶和脂肪的质量，g； —为接收瓶的质量，g； —样品质量，g。 —测定时用醚液的体积，mL； —含脂肪醚液的总体积，mL。 酸水解操作方法 酸水解法 开始加入8mL水是为防止后面加盐酸时干试样固化，水解后加入乙醇可使蛋白质沉淀，降低表面张力，促进脂肪球聚合，同时溶解一些碳水化合物如糖，有机酸等。后面用乙醚提取脂肪时因乙醇可溶于乙醚故需加入石油醚降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物残留在水层，使分层清晰。 挥干溶剂后残留物中若有黑色焦油状杂质，是分解物与水一同混入所致，会使测定值增大造成误差，可用等量的乙醚及石油醚溶解后，过滤，再次进行挥干溶剂的操作 若无分解液等杂质混入，通常干燥2h即可恒量。 脂肪的测定方法 原理 仪器试剂 适用范围 说明 操作方法 氯仿-甲醇提取法 索氏提取法对包含在组织內部的脂肪等不能完全提取出来，酸分解法常使磷脂分接而损失。而在一定的水分存在下，极性的甲醇及非极性的氯仿混合溶液却能有效地提取结合态脂类，如脂蛋白、蛋白脂等及磷脂，此法对于高水分生物试样如鲜鱼、蛋类等脂类的测定更为有效。 脂肪的测定方法 适用范围 原理 氯仿-甲醇提取法 将试样分散于氯仿-甲醇混合液中，于水浴上轻微沸腾，氯仿-甲醇混合液与一定的水分形成提取脂类的有效溶剂，在使试样组织中结合态脂类游离出来的同时与磷脂等极性脂类的亲合性增大，从而有效地提取出全部脂类。再经过滤，除去非脂成分，然后回收溶剂，对于残留脂类要用石油醚提取，定量。 脂肪的测定方法 适用范围 原理 思考 脂类测定提取剂的种类、优缺点 索氏提取法的原理、方法、注意事项 Thank You! 专业