临床输血与检验2012第二部分.ppt

临床输血与检验 张循善 2015.3 医疗机构输血科（血库）承担工作和研究领域 免疫血液学 实验室 血液相容性试验 血型不合新生儿溶血病实验室诊断 输血不良反应研究 成分输血与自身输血 血液治疗 血液成分单采和置换术（造血干细胞移植） 细胞治疗 临床输血质量管理 免疫血液学 血液相容性试验 ABO血型鉴定 RhD鉴定 红细胞意外抗体筛查和鉴定 交叉配血试验 ABO血型鉴定 正定型：被检者红细胞与ABO标准血清 反定型：被检者血清或血浆与ABO试剂红细胞 正定型试验方法（试管法） （1）取试管2支分别标上A、B字样 （2）向A管滴加抗A标准血清1滴，向B管滴加抗B标准血清1滴 （3）向A、B管各滴加5％的待检红细胞悬液各1滴。 （4)摇匀，后以1000rpm离心1min，或按说明书要求操作。 （5）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，以肉眼观察有无凝集现象。 反定型试验方法（试管法） （1）取试管3支分别标上A、B、O字样 （2）向A、B、O三管各滴加待检血清（浆）1滴 （3）向A管滴加A型试剂红细胞1滴，向B管滴加B型试剂红细胞1滴, 向O管滴加O型试剂红细胞1滴。 （4）摇匀，后以1000rpm离心1min，或按说明书要求操作。 （5）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。 结果判定 正定型 结果判定反定型 ABO血型鉴定的临床意义 （1）输血 血型鉴定是实施输血治疗的首要步骤，应该在受血者与供血者血型相同，交叉配血完全相合的情况下才能输血。正反定型一致，保证输血安全，例如类B。 （2）器官移植 受者与供者最好选择ABO血型相同进行移植，血型不符易引起排斥反应导致移植失败 （3）新生儿溶血 母子ABO血型不合可引起新生儿溶血病，主要是依据血型血清学检查来诊断 （4）其他 ABO血型检查还可用于亲子鉴定，法医学鉴定以及某些疾病相关的调查等 RhD血型鉴定（试管法） 原理 从理论上讲人类红细胞上的Rh抗原主要有C、c、D、d、E、e六种抗原，但目前尚未发现抗d，因此也未肯定d抗原，故Rh抗原主要有五种。其中RhD抗原性最强，因此，临床意义最大。一般情况，患者常规进行RhD血型鉴定。 RhD遗传 RhD血型鉴定（试管法） 操作方法 1. 取试管3支，分别标记检测管、阳性对照管、阴性对照管 2. 各管均加入抗D血清1滴 3. 检测管加入受检者红细胞悬液1滴 4. 对照管分别加入RhD阳性红细胞和RhD阴性红细胞各1滴 5. 摇匀，以1000rpm离心1分钟或按说明书操作，取出试管，判定结果 结果判定 如阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集， 受检管凝集，为Rh D阳性； 阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，受检管不凝集，则为Rh D阴性 Rh D血型鉴定的临床意义 （1）输血前检查 为了保证安全输血，输血前应做RhD血型鉴定。避免Rh阴性个体误输RhD阳性血液，防止发生同种免疫。 （2）新生儿溶血病诊断 由于IgG类的RhD抗体易通过胎盘，与相应抗原反应从而破坏胎儿红细胞，引起严重的新生儿溶血病 Coomb’s Test Use hemagglutination to detect: 1) Antibody–coated RBC’s (“Direct”) 2) Anti-RBC antibody in serum (“Indirect”) Direct vs. Indirect Coomb’s Test 交叉配血试验 盐水介质配血法 原理 ABO、MN、P等血型系统产生的抗体为IgM抗体，可在盐水介质中与红细胞表面的相应抗原发生反应，产生肉眼可见的凝集现象。IgG抗A、抗B的浓度足够大时，在盐水介质里中与红细胞也能发生凝集现象 试验方法 1. 取小试管两支分别标注主、次管 2. 主侧管内加入受血者血清和供血者红细胞悬液各1滴；次侧管内加入供血者血清和受血者红细胞悬液各1滴 3. 混匀，1000rpm离心1min 4. 轻轻摇匀后镜检 结果判定 主、次管均不凝集且无溶血为配血相合，有凝集或/和溶血为不合 。 凝聚胺配血法 原理 凝聚胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，缩短了红细胞之间的距离，红细胞之间排斥力的减弱，导致红细胞非特异性聚凝，这种凝聚是可逆的。当红细胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红细胞上相应抗原结合后，在凝聚胺的作用下发生凝集。凝聚和凝集外观上是不能区分的，再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与凝聚胺上的正电荷中和，凝聚现象消失，而抗原抗体反应产生的凝