安徽省安丰中学2016高考生物一轮规范训练1037基因工程(含解析).doc

10.37基因工程 1．(2015届中山质检)早在4年前，武汉大学就利用细菌将人的血清蛋白基因导入水稻体内，借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白和人体自然产生的这类物质是完全一致的，这一成果轰动了生物界，结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题。 (1)限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该怎样操作？________________，________________，________________。 (2)②过程常用的细菌是______________________________________________。 (3)③经历的生理过程主要有________________和________________两个阶段。培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是___________________________。 (4)基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可检测的物质有________________、________________、________________。 【答案】(1)用限制酶MunⅠ切割质粒　用限制酶EcoRⅠ切割含目的基因的DNA分子　用DNA连接酶连接目的基因和质粒　(2)农杆菌　(3)脱分化　再分化　细胞的全能性 (4)人血清白蛋白基因　人血清白蛋白基因转录出的mRNA　人血清白蛋白 【解析】(1)目的基因的两侧是限制酶EcoRⅠ的识别序列，因此需用限制酶EcoRⅠ切割含目的基因的DNA分子；但是若用限制酶EcoRⅠ切割质粒，会破坏标记基因，因此可用DNA连接酶连接目的基因和质粒。(2)将表达载体导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，因此常用的细菌是农杆菌。(3)过程③是组织培养获得完整植株的过程，因此主要的过程是脱分化获得愈伤组织，经再分化获得胚状体。转基因植物的培育体现了细胞的全能性。(4)目的基因的检测与鉴定在分子水平上来看，应进行目的基因、转录出的mRNA和翻译出的蛋白质三种物质的检测。 2．(2014·天津)嗜热土壤芽胞杆菌产生的β－葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下实验： Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶 (1)PCR扩增bglB基因时，选用_________基因组DNA作模板。 (2)右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的BglB基因两端需分别引入____________和___________不同限制酶的识别序列。 (3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为________________________。 Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响 (4)据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会______________；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在______________(单选)。 A．50℃　 B．60℃　　C．70℃　　D．80℃ Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性 在PCR扩增BglB基因的过程中，加入诱变剂可提高BglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。 (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中_____________(多选)。 A．仅针对bglB基因进行诱变 B．bglB基因产生了定向突变 C．bglB基因可快速累积突变 D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 【答案】(1)嗜热土壤芽孢杆菌 (2)NdeⅠ BamHⅠ (3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶 (4)失活　B (5)A、C 【解析】(1)bglB基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌基因组中，故应以该菌的基因组DNA为模板进行基因扩增。 (2)目的基因与质粒进行重组时，需将目的基因插入到启动子和终止子之间，且应靠近启动子和终止子，结合示意图可知，应在扩增的bglB基因两端分别引入NdeⅠ和BamHⅠ两种限制酶的识别序列。 (3)该基因表达载体中含有bglB基因，其可表达产生β－葡萄糖苷酶，其可分解纤维素，这样大肠杆菌就获得了分解纤维素的能力。 (4)由图2可知，BglB酶在80℃保温30分钟后，该酶就会失活；由图1可知，当温度为60℃～70℃时，酶活性较高，而由图2可知70℃时保温30分钟，酶活性开始减弱，而60℃保温30分钟后酶活性基本不发生变化，由此可知为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好应控制在60℃，故选B