(生化工程课件）下游加工过程概论.ppt

13． 下游加工过程概论 生物分离工程：回收生物产品分离过程 原理与方法 生物技术下游加工过程（Downstream Processing） 生物化工产品通过微生物发酵过程,酶反应过程或动植物细胞大量培养获得,从发酵液或培养液中分离精制有关产品的过程 概 论 知识点： l????下游加工过程在生物技术中的地位 l????传统生化产品和基因工程产品回收方法的比较 l????生物技术下游加工过程的特点 l????生化分离工程的一般流程和单元操作 l???? 选择纯化方法的依据 l? 非蛋白质类杂质的去除 重点： ? 掌握下游加工过程的概念、特点及其操作的常规程序 ?????了解生化工程的地位及其发展趋势 难点： √ 不同种类的产品分离纯化的一般流程和单元操作 天然产物研究研发平台 ①“银杏叶综合利用技术”项目 银杏叶黄酮 银杏内酯 银杏酸 聚戊烯醇 ②“柚子全组分综合利用技术”项目 ③“枇杷全组分综合利用技术”项目 不同蛋白质的溶解度与硫酸铵浓度关系 生物科学与生物技术及其产业的关系 生物技术多学科性 生物技术发展简史 传统生物技术 4000年前 中国、埃及、两河流域 酿酒造醋 初期生物技术 1680年 荷兰Leenwen hoek 显微镜 1857年 法国Pasteur 酒精发酵 灭菌法 1897年 德国Buchner 酶 近代生物技术 1943年 美英 青霉素 深层发酵 现代生物技术 1953年 ? 1944年阐明了DNA是遗传信息的携带者。??? 1953年提出了DNA的双螺旋结构模型，阐明了DNA的半保留复制模式，从而开辟了分子生物学研究的新纪元。??? 1961年等破译了遗传密码，揭开了DNA编码的遗传信息是如何传递给蛋白质这一秘密。 DNA的双螺旋结构模型 ??? 1972年首先实现了DNA体外重组技术，标志着生物技术的核心技术——基因工程技术的开始。 生物技术的最新进展 (1) 基因工程方面 试管婴儿、细胞融合、蛋白质序列分析，人参培养 (2) 生物反应器 连续式，柱式、固定化酶、固定化细胞反应器 (3) 发酵技术 如：固定化酶、固定化细胞技术? 生物技术产品的类型 按分子量大小 小分子产品：（小于1000）抗生素，有机酸，氨基酸 大分子产品：（大于1000）酶, 抗体，多肽，蛋白质 按产品所处的位置 细胞内: 胰岛素，干扰素，重组蛋白质 细胞外：抗生素，胞外酶 13.3 生物技术下游加工过程特点 生物产品特点： ① 产物浓度低的水溶液 (原因：a 氧传递限 制；b 细胞量;c 产物抑制 ② 组分复杂(a 大分子;b 小分子;c 可溶物;d 不可溶物;e 化学添加物 ③ 产物稳定性差(a 化学降解(pH , 温度); b 微生物降解 （酶作用， 染菌） ④ 分批操作，生物变异性大 ⑤ 质量要求高 （药品或食品） 13.4 生物分离的流程与单元操作 ① 细胞回收技术: 絮凝，离心，过滤，微过滤。 ② 细胞破碎技术: 球磨，高压匀浆，化学破碎技术 ③ 初步纯化技术: 吸附剂，离子交换，沉淀（盐析 法，有机溶剂沉淀，等电点，沉淀剂），溶剂萃 取，两水相萃取，超临界萃取，逆胶束萃取，膜 分离技术 ④ 高度纯化技术: 各类层析，亲和，疏水，聚焦，离 子交换，结晶 ⑤ 成品加工：浓缩，除菌与热原，喷雾干燥，气流干 燥，沸腾干燥，冷冻燥 13.4 生物下游加工过程的一般步聚 1、胶束与反胶束的形成 表面活性剂溶于水在水中聚集一起形成（正胶束）;极性基团在外,非极性基团在内,溶解非极性物质; 将表面活性剂溶于水中，当其浓度超过临界胶束浓度(CMC)时，表面活性剂就会在水溶液中聚集在一起而形成聚集体，在通常情况下，这种聚集体是水溶液中的胶束，称为正常胶束(normal micelle)。结构示意见图a。 13.5 生物下游加工过程的选择准则 ① 步聚少 ② 次序合理 ③ 产品规格 （注射，非注射） ④ 生产规模 ⑤ 物料组成 ⑥ 产品形式 固体 适当结晶， 液体，适当浓缩 ⑦ 产品稳定性 ⑧ 物性 溶解度， 分子电荷，分子大小，功能团，稳 定性，挥发性 ⑨ 危害性 ⑩ 废水处理 13.6 非蛋白类杂质的去除 （1） DNA A 阴离子交换（pH 4.0) B 亲和层析（不被吸附） C 疏水层析 （2）热原 （蛋白质溶液中的去热原）