11级生物术1班发酵工程实验计划方案.docVIP

生物技术一班发酵工程实验计划方案 一、实验日程表 序号 实验项目 时间 实验内容安排 1 培养基制备与灭菌 预计8学时 固体培养基配制500mL/组，分装2瓶； 培养皿清洗及包扎10副/组；无菌水90mL/瓶，9 mL/试管共6支； 1 mL or2 mL吸管包扎8支/组； 液体培养基制备：500ml/组，分装8瓶，灭菌0.1MPa,20min. 2 菌种分离 预计4学时 1、菌种的分离纯化:超净工作台消毒（UV照射20min）→75%乙醇擦拭台面；分离样品→无菌水溶解(稀释10-2倍)→涡旋震荡5min；倒平板(10副平皿/组)→平板划线分离→30℃倒置培养→目标菌株获得→制片及观察（显微摄影）。 3 种子制备 预计4学时 1、接种准备工作：超净工作台消毒（UV照射20min）→75%乙醇擦拭台面。 2、纯种培养接种：平板单一菌落→种子培养基（2环/瓶）→涡旋震荡3-5min； 3、摇瓶培养：摇床设置及调节（30℃，200r/m）→摇瓶固定→启动培养。 4 发酵罐结构认识、操作规程及分批发酵操作 预计8学时 发酵培养基配制：20Lor35L。 发酵罐操作培训：发酵罐初始状态检查及调节→清洗（清水冲洗2-3遍）→发酵罐运行启动→发酵罐运行参数设置→空罐灭菌（0.15MPa,20min）→进料→实罐灭菌（0.1MPa维持30min）→冷却→火焰封口接种→发酵参数稳