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影响因素 基本过程 理论依据 选材 生殖细胞(精子) 体细胞 不同点 选材、营养、激素、pH、温度、光照等 外植体 愈伤组织 丛芽 生根→移栽;无菌技术及接种操作基本相同 植物细胞的全能性 相同点 花药培养技术 植物组织培养技术 脱分化 再分化 诱导 2.植物组织培养技术和花药培养技术的异同 3.植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术比较 将植物生长发育过程中所需各种矿质元素按一定比例配成营养液,并利用这种营养液栽培植物 在无菌条件下,在适宜的营养和环境条件下对微生物的培养 在无菌条件下,将离体的植物体器官或组织接种在适当的培养基上进行培养,最终发育成完整植株 概念 无土栽培技术 微生物培养技术 植物组织培养技术 适宜的环境条件,基质垫底并固定幼苗,不需要保证无菌条件 严格控制无菌操作,整个培养过程无需更换培养基 严格控制无菌操作,在培养过程中要更换培养基,调节细胞分裂素和生长素的比例 特殊操 作要求 水、必 需矿质 元素 水、无机盐、碳源、氮源 等 水、矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物和植物激素等 培养基 成分 请回答下列有关植物组织培养的几个问题。 (1)离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是 ,其主要成分包括大量元素和 。培养中常用的两种植物激素是 和 ,两者使用时的 、 、 等,都会影响实验的结果。 (2)植物组织培养的一般步骤为 。 (3)下图为植物组织培养的部分过程。 ①过程是 ,②过程是 ,A是 。 (4)植物组织培养过程中还需要维持一定的外界条件,一是要有适宜的 ,二是 。 离体的器 官、组织 或细胞 ① ② A 植物体 解析 MS培养基包括大量元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素、有机物和植物激素(生长素和细胞分裂素)。使用激素时要特别注意激素的浓度、使用顺序、用量的比例,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。 答案 (1)MS培养基 微量元素 生长素 细胞分裂素 浓度 使用的先后顺序 用量的比例 (2)制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培 (3)脱分化 再分化 愈伤组织 (4)温度和pH等 无菌(环境) (09·山东卷)人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下: 请回答: (1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行 。接种前,要对人参根进行 。 (2)用于离体培养的根切块,叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落,属于 污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于 污染。 (3)用少量 酶处理愈伤组织,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量。 (4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶液,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法,操作时应采用 加热。 解析 (1)灭菌是指用强烈的物理或化学的方法,杀死物体内外的一切微生物,包括芽孢和孢子。消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止杂菌的污染,需要对固体培养基进行灭菌,对人参根进行消毒。 (2)用于离体培养的离体的植物组织或器官(或切块) 称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后,会形 成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的 子细胞集团,这就是菌落。我们可以根据菌落的特征判 断微生物的种类。霉菌的菌落较大,肉眼可见许多毛状 物,呈棕色、青色等,细菌菌落常表现为湿润、黏稠, 有光泽。 (3)果胶酶能够分解果胶,瓦解植物的细胞壁和胞间 层,使愈伤组织分离。 (4)人参皂苷溶于水溶性有机溶剂,可以用萃取法从 培养物干粉中提取。萃取时要采用水浴加热,这是因为 有机溶剂都是易燃物,用明火加热容易引起燃烧、爆炸。 答案 (1)灭菌 消毒(2)外植体 真菌(霉菌) 细菌 (3)果胶 (4)萃取 水浴 例1 下列对生物
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