04 实验四 抗药性突变株的分离课件.pptVIP

实验四 抗药性突变株的分离 一、目的要求 二、基本原理 三、材料方法 四、操作步骤 五、实验报告 一、目的要求 1、学习用梯度平板法分离抗药性突变株。 2、了解基因突变的特点。 3、了解诱变育种的原则和一般步骤。 二、基本原理 基因中碱基顺序的改变可以导致微生物细胞的遗传变异。 微生物的抗药性突变是DNA分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是作为引发突变的诱导物。 在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变体就会在平板上长成菌落。经过挑取纯化，进一步进行抗性试验就可以得到所需要的抗药性菌株。 为了便于选择适当的药物浓度，分离抗药性突变株常用梯度平板法。 本实验采用梯度平板法分离大肠杆菌的抗链霉素突变株。 三、材料方法 1、菌株 大肠杆菌：Strs 2、培养基 LB固体培养基（底层和上层） 3、溶液或试剂 链霉素（100mg/mL） 4、仪器或其他用具 1ml无菌吸管，盛有70%乙醇的烧杯，玻璃涂棒，水浴锅等 四、操作步骤 1、接种大肠杆菌于 盛有5ml LB液体培养基的试管中，37℃振荡培养24h。 2、在热水浴中溶化LB琼脂培养基。 3、倒10ml 已溶化的不含