中药指纹图谱的定(04年省药分学术会).pptVIP

中药指纹图谱的测定晁若冰（四川大学华西药学院） 一、测定中药指纹图谱的意义 中药指纹图谱的定义: 中药指纹图谱（Fingerprint）是经光谱、色谱或其他方法测定得到的中药组分群的特征图谱，带有综合、宏观、“模糊”的非线性特征，具有完整性和唯一性，是评价中药质量的重要手段之一。  测定中药指纹图谱的意义： 1. 对保证用药的安全、有效，保证药品质量的稳定具有意义。 2. 有利于中药作用机理的进一步深入研究。 3. 可以促进中药工业现代化，中药农业现代化。 4. 可以促进中药走向世界。 二. 检测方法 （一）色谱法 1. 薄层色谱法（TLC） 薄层色谱法分离效能高，操作简便，图像直观、形象，有多种显色剂供选择使用，可以作多样品的平行分析，使用薄层扫描法可以得到定量的薄层指纹图谱。 需使用标准的材料和条件，才能得到高质量的、可重复的结果。 薄层色谱法多用于无紫外吸收，不能用HPLC测定的样品，也可以作为HPLC的补充和佐证。   二. 检测方法 2. 高效液相色谱法(HPLC) 高效液相色谱法分离效能高，重复性好，准确性高，适用范围广，是指纹图谱测定应用最多的方法。 使用的检测器有：紫外检测器，蒸发光散射检测器，示差折光检测器，质谱（LC-MS）等。 多用反相色谱，也可以使用吸附色谱。如组分保留时间的差别很大，可以使用梯度洗脱。 二. 检测方法 3. 气相色谱法 (GC) 气相色谱法分离效能高，重复性好，准确性高，有通用型的检测器。主要用于挥发性样品的测定。 二. 检测方法 4. 毛细管电泳(HPCE) 毛细管电泳分离效能高，灵敏度高，对样品预处理的要求不太高。主要用于带电荷组分的分离，特别是大分子物质的分离，如蛋白质、多肽、核酸等。也可以用于小分子的或一般有机组分的分离。 二. 检测方法 （二）光谱法 1. 紫外分光光度法 是分子的电子光谱，反映生色团的特征吸收，不能反映组分整体的情况。紫外光谱的形状简单，易重叠，鉴别意义不大。 二. 检测方法 2. 红外光谱法（IR） 是分子的振动?转动光谱，结构的信息量较紫外光谱大，但对多成分的混合物，难以确定归属。 二. 检测方法 3. 核磁共振光谱(NMR) 核磁共振光谱的专属性强，信息量大，可以定量，是一种有前途的指纹图谱的测定方法。 三. 色谱指纹图谱研究的技术要求 （一）供试品的收集 以承认传统的功能主治和长期临床验证结果为前提，使用的标准样品应为经长期临床使用证明是安全、有效的样品。 要收集有代表性的供试品，至少10批。 （一）供试品的收集 1. 原料药材 应有稳定和固定的来源，要进行基原鉴定，并经检验符合中国药典或国家药品质量标准。 药材的“批”是指相互独立的供试品。应有完整的采样原始记录。 （一）供试品的收集 2. 半成品（提取物） 用符合要求的药材为原材料，用规范的工艺生产的半成品。应有完整的制备和相关信息的记录。 （一）供试品的收集 3. 成品 用符合要求的半成品和规范的工艺生产的产品。应有完整的制备和相关信息的记录。 （二）参照物 参照物：是指纹图谱测定用的参照物质。主要用于色谱峰的辨认，考察指纹图谱的稳定程度和重现性。 参照物一般选择容易获得的主要活性成分或指标成分，一个或一个以上。如无参照物也可以用指纹图谱中稳定的色谱峰作为参照峰。 参照物应有明确的化学结构、名称以及质量考察的指标。 （三）测定方法 1. HPLC 色谱条件的选择：首选反相HPLC。色谱柱：比较不同类型、不同牌号的色谱柱，选出适合的色谱柱，确定色谱柱的来源与规格。应考虑使用多数实验普遍使用的色谱柱。 流动相：至少用三种不同组成的流动相进行比较，选出最适合的流动相。如需要使用梯度洗脱，应尽量采用