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第十四章 蛋白质的生物合成 遗传信息传递的 中心法则 遗传信息流动示意图 目 录 第一节 蛋白质合成体系 mRNA 遗 传 密 码 三联体密码的破译 缺失或插入核苷酸引起三联体密码的改变 以均聚物为模板指导多肽的合成 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 核糖体结合技术 遗传密码字典 遗传密码的性质 反密码子与密码子之间的碱基配对 1966年Crick根据立体化学原理提出: 人线粒体中变异的密码子 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 tRNA 密码子与反密码子的配对关系 基因间的校正突变 核糖体 核糖体的组成 原核细胞70S核糖体的A位、P位及mRNA结合部位示意图 真核和原核细胞参与翻译的蛋白质因子 第二节 蛋白质合成的机理 氨基酸的活化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAiMet的形成 氨酰- tRNA合成酶特点 原核生物多肽链的合成过程 肽链合成的起始 某些原核生物mRNA中蛋白质合成起始区的序列 肽链的延长 肽链合成的终止及释放 肽键的形成 Tu\Ts循环 多多核糖体与核糖体循环 真核生物多肽链的合成(自学) 肽 链 的 折 叠 蛋白质的加工修饰 胰岛素原的加工 多核糖体 第四节 蛋白质定位 信号肽假说简图 一些真核细胞多肽链上N-端的信号肽的结构 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 带有导肽的线粒体蛋白质前体跨膜运送过程示意图 问答题 30S亚基? mRNA IF3- IF1复合物 30S? mRNA ? GTP- fMet –tRNA- IF2- IF1复合物 70S起始复合物 codon anticodon A位 P位 mRNA +30S亚基-IF3 A位 IF-3 5? 3? IF2 GTP P位 IF3 IF2 IF1 IF2-GTP-fMet-tRNA IF3 50S亚基 IF2+ IF1+GDP+Pi IF-1 IF1 70S起始复合物 1 2 1 2 2 3 2 3 进位 肽键形成 移位 进位 (Tu\Ts) GTP GTP N-端 2 3 5′ 3′ C-端 肽键形成 1 5′ 3′ (EF-G) (1)释放因子RF1或RF2进入核糖体A位。 (2)多肽链的释放 (3)70S核糖体解离 5? 3? UAG 30S亚基 50S亚基 5? 3? UAG tRNA RF Ts Ts-GDP 合成完毕的肽链 多核糖体 3ˊmRNA 延伸中的肽链 5ˊ 核糖体循环 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂; 2、起始氨基酸为Met,不是fMet; 3、肽链合成的起始:由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子,然后沿mRNA移动寻找AUG; 4、起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子; 5、真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 肽链折叠是指从多肽链的氨基酸序列形成具有正确三维空间结构的蛋白质的过程。 体内多肽链的折叠目前认为至少有两类蛋白质参与,称为助折叠蛋白: (1)酶:蛋白质二硫键异构酶(PDI); (2)分子伴侣 Lasky于1978年首先提出分子伴侣(mulecular chaperone)的概念,这是一类在细胞内能帮助新生肽链正确折叠与装配组装成为成熟蛋白质,但其本身并不构成被介导的蛋白质组成部分的一类蛋白因子,在原核生物和真核生物中广泛存在。 1、肽链末端的修饰: N-端fMet或Met的切除 2、信号序列的切除 3、二硫键的形成 4、部分肽段的切除 5、个别氨基酸的修饰 6、糖基侧链的添加 7、辅基的加入 实例:胰岛素原的加工 A链区 B链区 间插序列(C肽区) HS SH SH SH HS HS 信号肽 N C 核糖体上合成出无规则卷曲的前胰岛素原 切除C肽后,形成成熟的胰岛素分子 切除信号肽后折叠成稳定构象的胰岛素原 S S S S N N C C A链 B链 胰岛素 C N S-S S S 胰岛素原 S S 第一个编码区 第一个编码区 第二个编码区 第二个编码区 终止\起始 终止 起始 mRNA mRNA 5′ 5′ 3′ 3′ 1、分泌蛋白 ● 信号肽假说简图 ● 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 2、线粒体与叶绿体蛋白 ● 蛋白质向线粒体的定位机制 3ˊ 5ˊ SRP循环 mRNA 内质网膜 内质网腔 信号肽酶 信号肽 中心法则指出,遗传信息的表达最终是合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质,这种以mRNA上所携带的遗传信息,到多肽链上所携带的遗传信息的传递,就好象以一种语言翻译成另一种语言时的情形相似,所以称以mRNA为模板的蛋白质合
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