白血病淋巴瘤免疫分型课件.ppt

Keylab of Medicine School of Su Zhou University 白血病/淋巴瘤免疫分型苏州大学附属第一医院 江苏省血液研究所卫生部 血栓与止血重点实验室朱明清2010年8 月 杭州 流式细胞术的基本概念 流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选 研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量 散射光信号和荧光信号 前向角散射光（FSC, Forward Scatter） 入射激光的前向散射光信号 细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光（SSC, Side Scatter） 入射激光90?角的散射光信号 细胞粒度及细胞内相对复杂性 荧光素与特异抗体结合，荧光抗体与细胞抗原结合越多，产生的荧光信号越强。 CD45/SS示意图 实验对照的设计 空白对照：ALL 阴性对照：常用同型抗体对照 单色分析：设同型抗体对照 多色分析：同型对照，单阳性对照（用于仪器校正） 阳性对照：检测阴性时 抗原表达 需要用多少的标志来确证感兴趣的细胞群? 它们在细胞上的分布是不是很近? 它们是否在不同的细胞上表达不同? 他们表达强还是弱? 抗原分布 表面,胞