第一部分 微生物的利用课件.ppt

第一部分微生物的利用 本专题在模块中的地位和作用 1、《生物技术实践模块》突出课程的基础性、实践性、技术性和时代性。 2、本专题突出微生物培养技术在生物技术中的地位： 操作基础（从古至今历史悠久，难度不大，是基本的实验研究） 理论基础（为其他实验技术的发展提供理论依据） 研究材料基础（微生物取材容易，分布广泛，是体现其他生物技术的很好的实验材料） 3、具体活动内容 微生物的培养技术（培养、分离、技术的应用） 技术是基本相同，但可供选择的微生物的物种具有多样性。 实验1 大肠杆菌的培养和分离 （一）内容安排 1.体现以微生物（如大肠杆菌）培养为核心的微生物实验操作技术 2.体现生物学原理的应用（新陈代谢、遗传等） 实验1 大肠杆菌的培养和分离 （二）教材中实验内容安排 1．配制培养基的原则、方法，无菌操作的要求，灭菌相关技术，微生物分离的原理和微生物培养的条件。 2．进行大肠杆菌的扩增，用液体培养基操作细菌的培养。 3．进行大肠杆菌的分离，用固定平面培养基进行细菌的划线培养。 实验1 大肠杆菌的培养和分离 配置培养基、灭菌（课前提前准备） 微生物培养的相关知识，（操作、基本原理、培养基配制原则，如划线分离法等）（一课时或布置学生自学） 完成培养基倒平板操作和接种（一课时） 实验结果讨论（时间机动） 实验1 大肠杆菌的培养和分离 （一）需提前准备实验材料、仪器和试剂 1．灭菌锅或高压锅 2．250mL三角瓶、封口膜和橡皮圈 3．直径9cm培养皿 4．接种环和玻璃三角刮刀 5．恒温培养箱 6．摇床 7．酒精灯和超净台 8．一次性塑料手套 实验1 大肠杆菌的培养和分离 9．装有酒精棉球的广口瓶 10．镊子 11．有棉塞的试管 （1.5×12cm）5支 12．LB液体培养基 13．大肠杆菌菌种斜面 14．空白斜面 15 ．电子天平、称量纸、移液器 注意：大肠杆菌菌种斜面、空白斜面均为LB固体培养基，与LB液体培养基相比，在斜面制作过程中添加了琼脂作为凝固剂。 实验1 大肠杆菌的培养和分离 实验1 大肠杆菌的培养和分离 实验1 大肠杆菌的培养和分离 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 （一）内容安排 1.体现以微生物选择培养与计数为核心的微生物实验操作技术 2.体现生物学原理的应用 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 （二）教材中实验内容安排 1．使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）　　　 2．使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应 3．说明测定细菌数量的原理与方法 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 培养基的配制和灭菌操作 微生物培养的相关知识（或布置学生自学） ：如选择培养基、涂布分离法等。设计实验方案。 菌液制备、涂布分离、微生物培养（学生操作） 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 （一）需提前准备实验材料、仪器和试剂 1.设备及用品 ①250mL三角瓶1个和100mL三角瓶2个 ②有盖试管3支（1.5×15cm）和试管架 ③培养皿4个 ④超净台 ⑤移液器 ⑥玻璃刮刀 ⑦酒精灯 ⑧200mL烧杯1个 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 （一）需提前准备实验材料、仪器和试剂 2.材料 ①50mL70%乙醇 ②100mL三角瓶中的配制好的25mL全营养LB固体培养基，加上封口膜后灭菌待用 ③100mL三角瓶中的配制好的25mL尿素固体培养基，加上封口膜后灭菌，待冷至60℃时，加入通过G6玻璃漏斗过滤（使之无菌）后的10mL尿素溶液，摇动混合均匀后待用 ④3支有盖试管中均加入4.5mL蒸馏水后灭菌待用 ⑤250mL三角瓶加入99mL蒸馏水，加封口膜后灭菌待用 ⑥土样1g（在有哺乳动物排泄物的地方取得）。 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 （1）琼脂和琼脂糖 琼脂是一种未被纯化的混合物，主要成分为琼脂糖和琼脂果胶，还含有少量的含氮化合物，及其它有机杂质和不溶性杂质。琼脂作为微生物固体培养基不可缺少的组成成分，其优点是： ①其主要成分不能被微生物利用； ②可使培养基固化； ③不影响培养基中其他营养物质被细菌吸收。 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基中的分解，产生的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性，于是培养基中的酚红由黄色变成红色，圆形红色区域愈大，表明这种菌利用尿素的能力愈强。 （2）制备细菌悬液：在无菌条件下，在将1g土样加到装有99