组织培养与植物转基因案例.pptVIP

植物基因工程是指把不同生物有机体的DNA（或基因）分离提取出来，在体外进行酶切和连接，构成重组DNA（Recombinant DNA）分子，然后转化到受体细胞（大肠杆菌）使外源基因在受体细胞中复制增殖，然后借助生物的或理化的方法将外源基因导入到植物细胞，进行转译或表达。 也称为植物遗传转化、植物转基因等。 2 植物基因工程的载体 T－DNA 4.2 微弹轰击法 原理：金属微粒在外力作用下达到一定速度后，可以进入植物细胞，但又不引起细胞致命伤害，仍能维持正常的生命活动。也称为基因枪法。 利用这一特性，先将含目的基因的外源DNA同钨、金等金属微粒混匀，使DNA吸附在金属微粒表面，随后用基因枪轰击，使DNA随高速金属微粒进入植物细胞。 此方法可直接处理植物某器官或某组织，是当今普遍使用的植物转基因方法。 4.5 花粉管通道法 原理：将重组DNA涂于授粉的柱头上，使DNA沿花粉管通道或传递组织通过珠心进入胚囊，转化尚不具有正常细胞壁的卵、合子和早期的胚胎细胞，在活体内产生转基因种子。 花粉管通道法 4.6 显微注射法 原理：利用显微注射仪将外源DNA直接注入受体的细胞质或细胞核中。 重要问题：必须把受体细胞进行固定。 动物细胞具有独特的贴壁生长待性，因此不存在固定细胞的问题。 植物细胞的显微注射必须建立固定细胞技术。目前有三种方法：①琼脂糖（低熔点）包埋法；②多聚-L-赖氨酸粘连