依拉地平残留验证 扬州联博药业乔志毅 13852738030.docVIP

1. 依拉地平残留测定及方法学验证 1.1 测定仪器及检测条件 仪器: 安捷伦-6890N气相色色谱仪 ，N2000工作站 测定条件 柱:毛细管柱 DB-624，Catalog 123-1334 Serial No: US9323717H 规格: 30M×0.32mm×1.8μm 载气:N2 流速: 2.0ml/min , 柱温:程序升温 55℃ 保持2min以10℃/min升温150℃ 保持2min 进样器温度:180℃ 分流比:10:1 进样体积1ul 检测器 FID 温度：250℃ 氢气：40ml/min 空气：400ml/min 尾吹：30ml/min Rang 0 ATTEN 0 1.2. 专属性试验 精密吸取乙醇127μl（相当于100mg），醋酸乙酯111μl（相当于100mg），甲苯115ul（相当于100mg）别置3个事先装有少量二甲亚砜(DMSO)的100ml容量瓶中，用DMSO稀释到刻度，配置成3个相应的二甲亚砜溶液，分别吸取各溶液5ml到个50ml的容量瓶中，用DMSO稀释到刻度，配置成含各溶剂浓度均为100μg/ml的3种溶液A（乙醇），B（醋酸乙酯）, D(甲苯)溶液，取3个溶液及DMSO溶液在信噪比≥3条件下进样分析，出样顺序：乙醇A（RT=2.547），醋酸乙酯B（RT=4.308），甲苯C（RT=6.993），DMSO（RT=10.00）取上述A-C. 3溶液按1：1混合进样。其中乙醇，乙酸乙酯之间的分离度为27，乙酸乙酯和甲苯之间分离度为38，甲苯和DMSO之间分离度为2.8，且乙醇,醋酸乙酯,甲苯,理论塔板数均大于30000，对称性好。由于DMSO是稀释溶剂，浓度较大，不能真实反映与甲苯之间的分离度，我们分别吸取乙醇，乙酸乙酯，甲苯和DMSO各1ml混合，进样0.2ul，RANG为4，分流比100:1，四个成分之间分离度均大于28。 各溶剂分离度、理论塔板数 溶剂 分离度 理论塔板数 Rt 乙醇 27 39922 2.547 乙酸乙酯 38 84074 4.312 甲苯 2.8 177094 7.152 1.3．定量限检测限试验 （1）取专属性项下A乙醇溶液5.0ml到100ml容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，测定一次，再吸取该溶液2ml加3mlDMSO混合得浓度为2.0ug/ml，测定一次，再将该溶液稀释一倍，在信噪比大于10的条件下测得定量限浓度为1.0ug/ml，吸取1.0ug/ml溶液1ml到洗淋瓶中，加2mlDMSO混合，在信噪比大于3的条件下测得最低检测浓度为0. 33ug/ml （2）取专属性项下B（醋酸乙酯）,溶液5.0ml到100ml容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，测定一次，再吸取该溶液1.0ml加3mlDMSO混合得浓度为1.25ug/ml，测在信噪比大于10的条件下定一次，测得定量限浓度为1.25ug/ml，吸取1.0ug/ml溶液1ml到洗淋瓶中，加2mlDMSO混合，在信噪比大于3的条件下测得最低检测浓度为0. 42ug/ml （3）取专属性项下 C(甲苯) 溶液3.0ml到100ml容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，测定一次，再吸取该溶液1.0ml加4mlDMSO混合得浓度为0.6ug/ml，测在信噪比大于10的条件下定一次，测得定量限浓度为0.6ug/ml，吸取0.6ug/ml溶液1ml到洗淋瓶中，加2mlDMSO混合，在信噪比大于3的条件下测得最低检测浓度为0. 2ug/ml结果见表一，表二。 表一乙醇、醋酸乙酯、甲苯、定量限浓度，定量限 溶剂 定量限浓度（μg/ml） 定量限（ppm） 乙醇 1.0 20.0 醋酸乙酯 1.25 25.0 甲苯 0.6 12 表二：乙醇、醋酸乙酯、甲苯、检测限浓度，检测限 溶剂 检测限浓度（μg/ml） 检测限（ppm） 乙醇 0.33 6.6 醋酸乙脂 0.42 8.4 甲苯 0.2 4.0 1.4. 线性关系测定 . 标准溶液配置 精密吸取乙醇380μl（相当于300mg），，醋酸乙酯333μl（相当于300mg），甲苯57μl（相当于50mg），，置同一个事先装有少量二甲亚砜（DMSO）的200ml容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，配成含乙醇1500μg/ml，醋酸乙酯1500μg/ml，甲苯250μg/ml，的标准储备液，分别精密吸取标准储备液：1ml，2ml, 5ml，10ml，15ml，20ml到6个100ml的容量瓶中，用DMSO稀释到刻度，配成1#~6#的6个标准溶液。取上述六个标准溶液分别进样，线性关系见表三，四，五. 表三： 乙醇的线性关系 浓度（μg/ml） 峰面积 回归方程 相关系数 15 13522 Y=868.5x