脂蛋白测定.docVIP

实验三 血清（血浆）脂蛋白的测定 在脂蛋白中既有蛋白质又有胆固醇，还有磷脂的复合体，较难定量。由于其中的胆固醇含量较为稳定，因此目前以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋白的定量依据，即测定HDL、LDL或VLDL中的胆固醇，并分别称为高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）或极低密度脂蛋白-胆固醇（VLDL-C）。 磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白-胆固醇 测定血清HDL-C时，通常需根据各种蛋白的密度、颗粒大小、电荷等，采用超速离心法、色谱法、电泳法、化学或免疫沉淀法将HDL与其他脂蛋白分离开，然后测定HDL组分中胆固醇的含量。美国疾病控制与预防中心（CDC）测定HDL-C的参考方法为超速离心法。此法主要用于靶值的确定及各种HDL-C检测方法学评价，但因需特殊仪器，对技术操作要求高，一般实验室难以开展。色谱法和电泳法因仪器、操作要求高等种种原因临床常规实验室也较少应用，多用于脂蛋白的研究。 临床实验测定HDL-C的方法大致分为以下三类。第一类为化学沉淀法。常用的沉淀剂为聚阴离子/多阴离子，如磷钨酸（PTA）、硫酸葡聚糖（DS）、肝素或非离子多聚体如聚乙二醇（PEG）与某些两价阳离子（Mg2+、Ca2+、Mn2+）联合使用。最早为美国国立卫生研究院（NIH）所采用的肝素-锰沉淀法（HM法），后多采用硫酸葡聚糖- Mg2+（DS- Mg2